实验一 停通气缺氧预处理减轻窒息致心停跳大鼠脑缺血损伤 目的：观察停通气缺氧预处理对窒息致心停跳大鼠脑缺血损伤的影响。 方法： 成年雄性Wistar大鼠被随机分为：心停跳组(20只)，大鼠麻醉后插入气管导管连接小型动物呼吸机机械控制呼吸，监测基础生理指标10min后，停止通气4min，造成窒息心跳停止；预处理+心停跳组(20只)，监测大鼠基础生理指标10min后，停止通气1mm-恢复通气5min，连续进行4次，24小时后给予4min窒息心停跳；对照组(20只)，不进行预处理和心停跳，外科操作同另两组。观察各组大鼠心肺复苏后24小时死亡率；心跳停止所需窒息时间(T<,CA>)；恢复自主循环所需时间(T<,ROSC>)；测定心肺复苏后24小时脑含水量；心肺复苏后24、48、72小时神经功能评分(NDS)，包括神智清醒程度，颅神经功能，感觉运动功能以及简单的行为测试等，完全正常为100，死亡为0；并通过电镜和光镜观察心肺复苏后24小时海马区结构。 结果； 对照组大鼠全部存活，预处理组大鼠死亡率为5﹪，心停跳组大鼠死亡率为30﹪；与心停跳组相比，预处理组TcA明显延长(P<0.01)，而T<,ROSC>则明显缩短(P<0.01)；心停跳组与预处理组相比脑水含量也明显增多(P<0.05)；预处理组和心停跳组大鼠NDS显著低于对照组(p<0.01)，心停跳组大鼠NDS较预处理组亦明显降低(p<0.05)，预处理组和心停跳组大鼠复苏后72小时NDS较24小时要明显提高(p<0.05)；电镜及光镜显示，预处理组与心停跳组相比，海马区脑组织损伤明显减轻。 结论： 停通气缺氧预处理能明显减轻窒息致心停跳大鼠脑缺血损伤，并改善神经预后功能。 实验二 TLR4炎症信号通路在脑缺血耐受形成过程中的作用及机制研究 目的： 探讨TLR4信号通路在脑缺血耐受形成过程中的作用及可能机制。 方法： 成年雄性Wistat大鼠被随机分为：心停跳组(28只)，给予4min窒息心停跳；预处理+心停跳组(28只)，先连续给予4次停通气1min-恢复通气5min的预处理，24小时后给予4min窒息心停跳；单纯预处理组(20只)，只给予停通气缺氧预处理，不实施心停跳；对照组(28只)，不进行预处理和心停跳，外科操作同另两组。心停跳组和预处理+心停跳组于心肺复苏后(单纯预处理组在预处理后，对照组在外科操作后)的1、3、6、12、24、48和72小时断头处死大鼠，冰盘上操作取出脑组织。通过RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR的方法检测TLR4 mRNA的表达；用TransAM NF-кB检测试剂盒检测脑组织NF-кB的活性；酶联免疫吸附法(EUSA)检测脑组织TNF-a和IL-6含量。 结果： 对照组大鼠脑组织TLR4 mRNA表达微弱，NF-кB活性较低，而且它们在各个时相点没有显著变化；其余各组与对照组相比，在各个时相点(除72小时)TLR4 mRNA表达和NF-кB活性均显著升高，1小时即明显增强，3小时达到高峰，24小时有明显回落，随后继续减少，72小时已较弱。预处理组、预处理+心停跳组及心停跳组三组之间在不同时相点有明显差异，呈递增的趋势(预处理组<预处理+心停跳组<心停跳组)。 TNF-a和IL-6检测结果与TLR4 mRNA表达及NF-кB活性变化趋势基本一致。对照组TNF-a和IL-6产生较少，在各个时相点无明显差别。其余各组与对照组相比，表达均明显的增强；1小时表达即明显增强，TNF-a在3小时表达达到高峰，其后一直维持在较高水平，直到24小时才有明显回落，而IL-6的表达高峰出现在12小时，随后表达继续减少，72小时表达已较弱，但与对照组相比，还是明显增多。预处理组、预处理+缺血组及缺血组三者之间在同一时相点有明显差异，呈递增的趋势(预处理组<预处理+缺血组<缺血组)。 结论： TLR4炎症信号通路可能参与了脑缺血耐受的形成，停通气缺氧预处理可能通过预先激活TLR4信号通路来抑制随后严重缺血所诱发的炎症反应，从而减轻脑缺血损伤。