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小核苷酸如microRNA、siRNA等作为药物应用于多种疾病的临床治疗潜力巨大,但将核酸药物高效靶向性地递送到目标器官或目标细胞是十分困难的。因此设计和选择适宜的递送载体是目前核酸药物临床应用亟待解决的问题。胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs)是由细胞分泌的囊泡,内部包含多种蛋白质、核酸、脂质等生物大分子。EVs可将供体细胞来源的蛋白或核酸传递到受体细胞中,起到信号传递、物质运输等功能。基于核仁素在多种癌细胞(如乳腺癌细胞)膜表面高水平表达,且核酸适配体AS1411可以特异性识别并特异性结合膜表面核仁素蛋白,故本研究采用核酸适配体AS1411修饰EVs来构建一个可以靶向递送microRNA或si RNA到乳腺癌细胞的核酸药物递送系统,并研究其抗肿瘤的功能。本研究通过荧光显微镜成像和流式细胞仪分析技术,首先在体外细胞水平验证了AS1411-EVs靶向递送microRNA到三阴乳腺癌细胞MDA-MB-231中的效率和特异性。进而小动物活体成像技术验证AS1411-EVs递送荧光素标记的microRNA,靶向裸鼠体内乳腺癌的效率和特异性。同时小鼠在体实验,未发现AS1411-EVs有明显的毒性和免疫原性。之后,我们选择具有抑癌功能的microRNA let-7和VEGF si RNA作为核酸药物的代表,通过AS1411-EVs在体外和体内将其特异性的递送到乳腺癌细胞中,Realtime PCR和Western Blot方法检测核酸药物的靶基因表达情况。结果表明,microRNA let-7靶基因K-RAS、cMyc和VEGF siRNA的靶点VEGF蛋白表达均下调。更为重要的是,在荷瘤小鼠体内,通过AS1411-EVs靶向递送let-7后,小鼠的肿瘤生长明显被抑制。根据结果可知,本研究设计并构建的这种新型的靶向乳腺癌的小核酸递送系统,为核酸药物肿瘤治疗提供了新思路及实验支持和理论参考。