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烟草病毒病是烟叶生产中重要限制因素,引起产量降低质量下降,目前没有有效的防控措施。本文首先调查采样,通过ELISA检测分析,初步了解了云南昆明市各烟区烟草上烟草病毒种类及发生分布情况,研究了主要病毒病害烟草花叶病毒病的绿色防控技术。为了解掌握昆明烟区烟草病毒种类和发生分布情况,本论文自2010和2011年两个烟草生产季对昆明各烟叶种植县（市、区）进行田间调查采样。田间调查发现由烟草花叶病毒（TMV）引起的花叶病是主要病害,严重地块的发病率达90%。共采集疑似病毒病样318份,用ELISA检测技术对样品进行检测,共检测到病毒13种,即TMV、马铃薯Y病毒（PVY）、黄瓜花叶病毒（CMV）、烟草蚀纹病毒（TEV）、烟草坏死病毒（TNV）、烟草脉带花叶病毒（TVBMV）、南美红辣椒脉斑驳病毒（ChiVMV）、番茄斑萎病毒（TSWV）、番茄环纹斑点病毒（TZSV）、鸢尾黄斑病毒（IYSV）、花生黄斑病毒（GYSV）、花生顶芽坏死病毒（GBNV）和凤仙花坏死斑病毒（INSV）.除TMV外,其余病毒检出率分别为：PVY为11.95%、CMV为0.86%、TEV为10.40%、TNV为15.85%、TVBMV为38.12%、ChiVMV为10.40%、TSWV为11.32%、TZSV为44.83%、IYSV为1.72%、GYSV为0.86%、GBNV为6.03%和INSV为1.72%。进一步用RT-PCR对ELISA检测为TVBMV、ChiVMV、TSWV、TZSV和INSV阳性的部分样品进行检测。序列测定、分析发现：TVBMV的寻甸分离物和宜良分离物3’-末端序列（1624nt）与NCBI上报道的TVBMV云南分离物（AM236826）的核苷酸序列相似性最高,相似性分别为97%和92.7%；CP氨基酸相似性分别为98.5%和95.9%。ChiVMV宜良分离物3’-末端序列（1792nt）与NCBI上报道的ChiVMV印度辣椒分离物（EF213675）的核苷酸序列相似性最高,相似性为84%；CP氨基酸相似性为88.7%。得到4个县的TZSV病毒分离物共21个,经扩增测序和序列比对鉴定为同一分离物,与GenBank中报道的TZSV N基因序列（NC010489）核苷酸相似性在93.5%～99.6%之间；氨基酸相似性在98.2%～99.3%之间。得到4个县的7个TSWV N基因序列,序列比对鉴定为同一分离物,与GenBank中报道的TSWVN基因序列（NC002051）核苷酸相似性在95.4%～95.8%之间；氨基酸相似性在97%～97.5%从石林的2个样品中分离得到了INSV病毒分离物,序列比对鉴定为同一分离物,该分离物与本实验室报道的INSV蝴蝶兰分离物N基因的核苷酸相似性为98.4%（HQ317133）；氨基酸相似性为99.6%。在3’-末端测序的基础上,首次对云南烟草上分离到的ChiVMV全序列进行了测定,得到9724nt的序列,NCBI Blastn同源性比对结果显示,所得ChiVMV全序列与NCBI上报道的文昌（海南）ChiVMV辣椒分离物全序列（GQ981316）同源性最高,为93%。据NCBI报道的ChiVMV全序列,本论文所述的ChiVMV全序列为烟草分离物ChiVMV全序列的首次报道。通过田间试验,筛选到三种生物源有机诱导抗病剂：3-丙酮基-3-羟基羟吲哚（3-acetonyl-3-hydroxyoxindole, AHO）、多肽保（Devitalized Mycelium of Penicillium, DMP）和几丁聚糖（Chitosan）能够有效抑制TMV。AHO和几丁聚糖在移栽后每7天分别喷施1次,连续用药4次后,AHO对TMV的相对防效为63.22%,几丁聚糖的相对防效仅为20.04%；多肽保作为移栽时底肥施用,在移栽4周后的相对防效为87.43%。在组合试验中,以多肽保为育苗基质和移栽时底肥,在每次剪苗前分别喷施AHO和几丁聚糖,移栽后每7天喷施1次,连续用药4次后,结果分析发现：“AHO+多肽保”和“多肽保+几丁聚糖”两个组合试剂的相对防效显著优于各种药剂单独施用的效果。“AHO+多肽保”移栽7周后的平均相对防效为78.41%,“多肽保+几丁聚糖”移栽7周后的平均相对防效为69.71%。“AHO+多肽保”组合防控试剂不仅能够满足烟草生产对TMV防控的需求,而且施用生物源抗病毒制剂AHO和多肽保能够大大减少化学农药的施用,既降低了烟叶的化学农药残留,又有效保护了生态环境。