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[目的]近年来以甲基苯丙胺(METHamphetamine,METH)为代表的新型合成毒品的滥用日益严重,吸食人员不断增加。因其具有强烈的中枢兴奋性及成瘾性,长期吸食易导致机体器官损害、精神病,甚至引发暴力、犯罪等情况导致严重的社会公共卫生问题。随吸食人员低龄化趋势加重,对其造成的生殖系统损害也愈发收到人们重视。本研究通过对成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠腹腔注射甲基苯丙胺,研究其对生殖功能损害的影响及相关性腺激素水平及雄、雌激素受体的变化,以期为METH滥用对男性生殖系统及性腺轴激素及激素受体的影响提供理论依据。[方法]通过在成年雄性大鼠腹腔内注射甲基苯丙胺建立METH染毒模型,研究甲基苯丙胺对雄性大鼠生殖系统的损害。40只雄性SD大鼠随机分为急性对照组、急性暴露组、慢性对照组、慢性暴露组,每组10只。通过观察METH染毒组一般情况,并对其重复刻板行为进行评分及记录持续时间,证实染毒模型建立成功。通过麻醉大鼠取睾丸称重,计算睾丸指数变化,苏木精-伊红(Hematoxylin-Eosin Staining,HE)染色观察睾丸组织生精细胞结构变化,并取附睾精液行精液质量检测,研究METH对大鼠睾丸及精子的损害。利用酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immuno sorbent assay,Elisa)检测大鼠血清中相关性腺激素水平,包括血清睾酮(Testosterone,T)、雌二醇(Estradiol 2,E2)、卵泡刺激素(Follicle stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)、孕酮(Progesterone,PROG)、泌乳素(Prolactin,PRL)水平和抑制素 B(Inhibin B,INHB)的浓度水平,研究实验组大鼠血清内相关性腺激素水平的变化。通过免疫组织化学染色(Immunohistochemistry,IHC),实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction,QRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting,WB)检测睾丸内雄激素受体(Androgen receptor,AR)、雌激素受体α(Estrogen receptor α,ERα)及雌激素受体β(Estrogenreceptor β,ERβ)在实验大鼠睾丸中的定位及表达变化。[结果]给药后,观察METH染毒组大鼠给药后的一般情况,发现大鼠警觉性增加,出现反复点头、探索等重复刻板行为。通过刻板行为评分发现与急、慢性对照组相比,急、慢性暴露组的刻板行为评分显著增高(P<0.05),证实实验大鼠成瘾,染毒模型制作成功。通过测量体重及双侧睾丸重量,发现急、慢性暴露组大鼠体重较对照组明显下降(P<0.05),且慢性暴露组大鼠睾丸指数小于对照组(P<0.05)。睾丸HE染色观察发现急、慢暴露组中睾丸生精细胞层次改变,生精细胞减少、紊乱,慢性暴露组睾丸中明显出现生殖细胞脱落及生精管腔中无精子形成。精液质量分析结果显示:慢性暴露组中附睾精液浓度及总活力明显低于对照组大鼠(P<0.05)。以上结果提示METH严重影响SD大鼠的生精功能。通过研究METH暴露对SD大鼠性腺激素的影响,结果显示急性暴露组及慢性暴露组中T的水平明显低于对照组(P<0.05,P<0.01);慢性暴露组中E2和INH B较慢性对照组显著降低(P<0.05,P<0.05),然而慢性暴露组中PRL较慢性对照组显著升高(P<0.01)。此外,为了研究METH对SD大鼠AR、ERα、ERβ的表达的影响,IHC结果提示:AR广泛分布于睾丸间质细胞,支持细胞与精原细胞的细胞核内,但精子未见表达;ER广泛分布于睾丸内各生精细胞,且积分光密度值定量提示AR、ERα、ERβ在急、慢性暴露组显著降低。QRT-PCR和WB结果提示急、慢METH暴露组中睾丸内AR、ERα、ERβmRNA和蛋白相对表达量均较对照组减少。[结论]通过在雄性大鼠腹腔内注射METH构建染毒模型发现,慢性METH暴露可损害雄性大鼠的生精功能,其相关机制可能是通过影响雄性大鼠性腺激素水平和睾丸内性腺激素受体AR、ERα、ERβ表达量减少所致。