利用Cre-loxP系统特异删除转基因番茄果实中PinⅡ基因的研究

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来源于细菌噬菌体P1的Cre-loxP重组系统已被广泛地用于酵母、动物、植物基因组的修饰和基因表达的调控.该实验研究的主要目的是检测Cre-loxP重组系统能否在转基因番茄中,由于Cre基因在果实中表达,从而将侧翼含两个同向loxP位点的外源基因-马铃薯蛋白 酶抑制Ⅱ基因(PinⅡ),特异性地从转基因番茄的果肉组织中删除,而株的蓁部分仍然含有PinⅡ基因.为此,研究人员构建了2A12启动子驱动Cre基因的结构以及两端是同向loxP识别 位点的35S/PinⅡ结构的两种植物表达载体.将它们分别转化番茄,得到两种转基因番茄株 亲本,它们分别携有2A12-Cre及loxP-35S-PinⅡ-loxP的结构.通过这两种转基因番茄的杂 交得到F1代植侏,对F1代植株进行筛选获得了同时含有两种基因结构的植株.该实验提供了一种由Cre-loxP系统介导的从特定器官中删除外源的模式,为植物基因组遗传特性的人工修饰提供了一种可以应用的途径.运用该系统在特定的时空删除一段DNA在植物基因工程中有 重要的应用前景.
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