目的探讨HBV通过上调miR-499a调节其靶基因，进而影响HCC发生的机制。方法1.用Real-time PCR的方法检测HepG2和HepG2.2.15细胞及瞬时感染HBV腺病毒后miR-499a的表达；在SMMC7721细胞中过表达HBV四种主要蛋白，分析四种主要蛋白对miR-499a的表达影响；构建miR-499a的启动子双荧光素酶报告质粒，将其与HBV及其四种主要蛋白的表达质粒共转染入SMMC7721细胞中，检测启动子的相对活性。2.构建miR-499a的表达质粒及稳定表达miR-499a的细胞系。将miR-499a表达质粒或miR-499a inhibitor转染入SMMC7721细胞中，用MTS、克隆形成实验检测细胞增殖的变化，用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移的变化；用稳定细胞系进行裸鼠成瘤实验验证miR-499a对细胞增殖的作用。3.构建MAPK6的3’UTR的双荧光素酶报告质粒。在过表达和干扰miR-499a的情况下，用双荧光素酶报告系统、Real-time PCR和Western blot方法在基因水平、mRNA水平和蛋白水平验证其是否为miR-499a的靶基因。4.构建MAPK6的表达质粒，将表达质粒或者干扰siRNA转染入SMMC7721细胞中，用MTS和克隆形成实验方法验证MAPK6对细胞增殖的作用。并在过表达miR-499a或HBV的同时共转染表达MAPK6的质粒，用MTS方法分析其是否通过MAPK6影响细胞的增殖。结果1. HBV可以上调miR-499a的表达， HBx、HBs、HBp均可以不同程度的促进miR-499a的表达。HBV可以通过促进其启动子的活性上调miR-499a的表达。2. miR-499a可以促进肝癌细胞的增殖和迁移。3. MAPK6是miR-499a的靶基因。4. MAPK6可以促进肝癌细胞的增殖，miR-499a对肝癌细胞的增殖作用可能是通过MAPK6发挥作用的。结论HBV可以通过调节miR-499a，促进HCC细胞的增殖和迁移，影响HCC的发生和发展。