按压股四头肌肌腱对缺血性脑卒中后肌痉挛大鼠脊髓cAMP和PKA的影响

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目的:通过研究按压股四头肌肌腱对缺血性脑卒中后肌痉挛(Ischemic Poststroke Myospasm,IPSS)大鼠脊髓组织环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的影响,探讨按法缓解脑卒中后肌痉挛状态的机制。方法:45只编号大鼠由SPSS26.0赋予随机数字按大小进行排列,空白组和假手术组分别6只,其余大鼠为模型制备组。依据先造模再分组的方法,将符合造模成功标准的大鼠随机分入模型组和按法治疗组,最终满足每组6只。大鼠造模前体重均在280-300g,手术操作前所有大鼠均禁食不禁水。手术操作日(0d)假手术组进行除结扎和插栓线的操作,模型制备组采用改良Zea Longa栓线法于右侧制作永久性大脑中动脉栓塞(permanent middle cerebral artery occlusion,p MCAO)模型。术后1d对模型制备组的大鼠进行神经功能损伤Zea Longa(ZL)评分,评分为2分和3分的大鼠再根据改良Ashworth量表(Modified Ashworth Scale,MAS)进行痉挛评定,符合1级、1+级和2级的大鼠最终为造模成功,再随机分入p MCAO模型组和按法治疗组。术后2d-6d进行干预,空白组、假手术组、p MCAO模型组进行捆绑,按法治疗组采用自制“按法刺激器”按压左侧股四头肌肌腱。运用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定大鼠脊髓L1-L3节段中c AMP、PKA及GABA的含量。结果:1.ZL评分:术后1d,出现1分的3只,2分的为20只,3分的为7只,0分与4分的0只。2.MAS评级:27只符合ZL评分的大鼠中,0级6只,1级12只,1+级5只,2级2只,3级2只,4级0只。各组干预前:与空白组比较,假手术组痉挛程度无明显差异(P>0.05),p MCAO模型组和按法治疗组痉挛程度均上升(P<0.05);与假手术组比较,p MCAO模型组和按法治疗组的痉挛程度增高(P<0.05);与p MCAO模型组比较,按法治疗组无明显差异(P>0.05);提示造模成功。各组干预后:与p MCAO模型组比较,按法治疗组的大鼠痉挛程度下降(P<0.05),提示按法干预可以缓解IPSS大鼠的肢体痉挛状态。3.大鼠脊髓L1-L3节段中c AMP、PKA和GABA含量变化:与空白组比较,假手术组的c AMP、PKA和GABA含量变化无明显差异(P>0.05),p MCAO模型组和按法治疗组的含量均降低(P<0.05);与假手术组比较,p MCAO模型组和按法治疗组的c AMP、PKA和GABA的含量均降低(P<0.05);与p MCAO模型组比较,按法治疗组脊髓中c AMP、PKA和GABA的含量均上升(P<0.05);提示按压股四头肌肌腱可以增加脊髓中c AMP、PKA和GABA的含量。结论:1.按压股四头肌肌腱能够改善缺血性脑卒中后肌痉挛大鼠的肢体痉挛程度;2.按法改善脑卒中后肌痉挛,其作用机制与上调缺血性脑卒中后肌痉挛大鼠脊髓c AMP、PKA和GABA相关。
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