目的基于肠道菌群-肠-肝轴探讨维生素D缺乏对肠道菌群以及肠道屏障功能的影响和酒精性肝损伤的炎症发病机理。方法将4周龄C57BL/6Cnc雄鼠随机分为四组,分别为对照组(Ctrl),单纯维生素D缺乏组(VDD),酒精组(Et OH)和酒精合并维生素D缺乏组(Et OH+VDD)。四组分别采用相应的饲料喂养:Ctrl组喂养普通液体饲料,VDD组喂养单纯缺乏维生素D的普通液体饲料,Et OH组喂养Lieber-De Carli酒精液体饲料,Et OH+VDD组喂养单纯不含维生素D的酒精液体饲料。喂养期间每周监测小鼠体重和收集小鼠粪便。6周后剖杀,取血清用于检测ALT和AST含量及25(OH)D水平。取肝脏称重后,取肝脏一部分用4%的多聚甲醛固定,制备石蜡切片用于评价肝损伤程度,余下肝脏部分分装置-80℃冰箱保存,采用实时定量PCR及蛋白免疫印迹分析检测各种炎性因子表达水平;结肠取出后测量长度,分装置-80℃冰箱保存,分别利用实时定量PCR及蛋白免疫印迹分析检测各种炎性因子表达水平和肠道紧密连接蛋白的表达水平,收集的小鼠粪便分装置-80℃冰箱保存,进行宏基因组测序。结果对照组和酒精组的小鼠血清25(OH)D浓度分别(57.64±2.1 ng/m L)和(56.18±2.94 ng/m L),显著高于单纯维生素D缺乏组(12.82±1.4 ng/m L)和酒精合并维生素D缺乏组(10.36±2.23 ng/m L),证明维生素D缺乏造模成功。较对照组,酒精组小鼠体重减轻,但肝重和肝脏系数上升,结肠长度缩短,血清ALT和AST含量均明显升高;肝脏病理切片可见大量脂滴浸润和炎性细胞浸润;肝脏组织中促炎因子tnf-α,il-6,il-1β和趋化因子ccl2的m RNA水平显著升高;肝脏组织的炎症蛋白表达量显著升高;结肠组织中促炎因子tnf-α,il-6,il-1β和趋化因子ccl2的m RNA水平也显著升高;结肠组织中肠屏障功能蛋白Occludin和E-cadherin的表达量显著降低。较酒精组来说,维生素D缺乏合并酒精组小鼠的体重有减轻趋势,肝脏重量有升高趋势。在慢性摄入酒精的基础上,同时期的维生素D缺乏干预会升高小鼠肝脏系数和血清ALT含量,显著降低肠道屏障功能蛋白表达水平,进一步上调肝脏和结肠组织中炎症相关基因的m RNA表达,肝脏炎症相关蛋白的表达水平升高,进一步激活了NF-κB通路。肠道菌群分析发现,四组小鼠的菌群组成具有显著性差异,在门水平上,厚壁菌门和蓝藻菌门在四组之间差异具有显著意义,在科水平上,明串珠菌科,分支杆菌科,消化链球菌科,普雷沃氏菌科,黄单胞菌科四组间具有显著性差异。结论维生素D缺乏合并慢性酒精摄入会影响小鼠肠道菌群组成成分,维生素D缺乏会进一步降低肠道屏障紧密连接蛋白表达的下调以及升高肝脏和结肠组织中炎症相关因子表达的上调,进一步激活肝脏组织炎症NF-κB通路从而加重酒精性肝损伤。