目的：糖尿病肾病（diabetic kidney disease, DKD）是糖尿病最常见的血管并发症之一，也是引起慢性肾功能衰竭的重要原因之一。足细胞作为一种高度特异性分化的终末分化细胞，位于肾小球基底膜外侧，作为肾小球滤过屏障的最外层细胞成分，参与了滤过屏障成分的更新，并对血液中蛋白成分的滤过发挥着重要的作用。足细胞的损伤与DN的发生发展密切相关，主要表现为足细胞数目减少，而凋亡可能是其发生的重要原因之一。内质网应激是机体在应激时的主要反应之一，对决定细胞最终的结局如抵抗、适应、损伤或凋亡有重要作用。大量的研究表明糖尿病肾病时足细胞凋亡的过程中，内质网应激参与并发挥了重要作用。细胞周期素依赖性蛋白激酶5（cyclin-dependent kinase5，CDK5）是一种丝/苏氨酸（Ser/Thr）蛋白激酶,作为细胞周期素依赖性蛋白激酶（CDK）家族成员之一，可被缺血、氧化应激等各种因素异常激活5，从而无节制地磷酸化其底物，引起各种病理改变。内质网应激发生时，可以过度激活CDK5，引起组织病变。高糖状态下，内质网应激是否可通过异常激活CDK5诱导足细胞凋亡？本研究拟通过体外培养条件性永生化小鼠足细胞，观察高糖状态下，内质网应激对足细胞中CDK5表达的影响，及CDK5在内质网应尽诱导足细胞凋亡中的作用。　　方法：体外培养条件性永生化小鼠足细胞，在33℃，γ-IFN存在的许可条件下培养传代后，于37℃，无γ-IFN的非许可条件下培养10-14天，促进细胞分化成熟。取37℃培养10天的足细胞，按如下分组：①对照组（Control）；甘露醇（M）组；高糖组（HG）。分别高糖刺激6、12、24和48 h。②对照组（Control）；高糖组（HG）；高糖+Salubrinal组（HG+Sal）。Salubrinal分别使用20和50μM。分别处理24和48 h。③对照组（Control）；Tunicamycin组（TM组）；Tunicamycin+CDK5 miRNA组（TM+miCDK5）；Tunicamycin+Roscovitine组（TM+ROS）。TM浓度分别采用1.0μM。各组分别刺激12 h后收集细胞，进行检测。提取细胞总蛋白，Western blot法检测GRP78、Caspase-12、CHOP和CDK5的表达；免疫细胞荧光检测CDK5的表达；TUNEL法及流式细胞术检测细胞凋亡。　　结果：　　1.高糖诱导足细胞中内质网应激标志蛋白GRP78、Caspase-12、CHOP表达的增高　　Western blot检测结果显示， HG组足细胞中GRP78的表达随高糖刺激时间的延长呈明显的时间依赖性增高。同时，足细胞中Caspase-12和CHOP的表达也呈明显的时间依赖性增高，提示高糖可通过诱导内质网应激反应发生导致足细胞损伤。　　2.Salubrinal抑制高糖诱导的内质网应激反应及足细胞凋亡　　采用Salubrinal抑制内质网应激后，高糖诱导的GRP78、Cleaved Caspase-12及CHOP的表达水平显著降低，并随刺激时间的延长，上述指标表达明显降低，呈现出时间依赖性的趋势。流式细胞术检测结果显示，高糖刺激后，HG组足细胞凋亡率显著增高，而分别应用20和50μM的Salubrinal抑制内质网应激后，高糖诱导的足细胞凋亡水平呈显著降低　　3.Salubrinal抑制高糖刺激足细胞中CDK5的表达　　Western blot检测结果显示，免疫细胞荧光结果显示，Salubrinal处理后，HG+Sal组足细胞中CDK5蛋白的荧光表达水平显著低于HG组。结果提示抑制内质网应激可以降低高糖刺激足细胞中CDK5的表达水平。　　4.抑制CDK5对Tunicamycin诱导足细胞凋亡的影响　　TUNEL及流式细胞术检测结果显示，与Control组相比，TM组足细胞凋亡率在48h时明显升高。应用CDK5 miRNA和Roscovitine抑制足细胞内CDK5表达及激酶活性后，TM诱导的足细胞凋亡率显著降低　　结论：　　1.高糖可以诱导足细胞ERS发生，ERS标志蛋白GRP78、Caspase-12和CHOP表达明显升高；高糖可通过诱导ERS增强足细胞中CDK5的表达，导致足细胞的凋亡　　2.抑制ERS可以显著降低高糖刺激足细胞中CDK5的表达水平，显著抑制高糖导致的足细胞凋亡；　　3.抑制CDK5可以显著降低Tunicamycin诱导的足细胞凋亡。