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新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起禽类的一种急性、烈性、高度接触性传染病,被国际兽疫局列为A类动物传染病。到目前为止,世界范围内已发生过四次ND大流行,给各地养禽业发展造成了严重损失。作为NDV自然贮存库的水禽,曾一度被认为对该病毒具有很强的抵抗力,感染后不表现任何临床症状,即使感染强毒也不发病。但1997年以来,我国华东和华南地区先后发现了一种以侵害鹅的消化道和免疫器官为主要特征的传染病,该病已在我国大部分地区呈流行趋势,严重影响了我国养鹅业的健康发展。目前已证实,该病的病原为新城疫病毒,其基因型以F基因Ⅶ型为主。理论上讲,NDV只有一个血清型,经典的ND疫苗(Ⅰ系、Ⅳ系等)的预防接种完全能够抵抗病毒的感染。然而,用作种毒的特定疫苗毒株,经过反复传代或长期使用,可能会出现毒力增强或免疫原性减弱等问题,从而使疫苗的保护力减弱,增加了疾病防制的难度。免疫失败导致的非典型ND的发生,对鹅致病的NDV强毒株的出现,不同基因型NDV的共同存在,这些问题的出现与临床上长期、大量地使用活疫苗所造成的免疫压力有关。因此,筛选免疫原性较好的NDV弱毒株作为疫苗侯选株,从流行病学和免疫学的角度来说,均具有重要的现实意义。笔者于江苏省某健康鹅群筛选到一株NDV,通过鸡胚接种和血清学试验进行分离、鉴定,结果表明该毒株具有血凝活性,且该活性能被抗NDV标准阳性血清所抑制。应用电镜技术、生物学特性检测等方法对该毒株进行鉴定,电镜下可见大量呈多形性的NDV病毒粒子,表面有囊膜。该毒株的MLD=10-5/0.1ml,MDT=148.8h,ICPI=0.375,参照新城疫的毒力判定标准,确定该分离株为NDV弱毒株,命名为G0405。应用RT-PCR技术对G0405毒株的F基因进行扩增,扩增产物经鉴定后进行克隆、测序,利用基因分析软件对测定的F基因核苷酸序列及由其推导的氨基酸序列进行分析,并绘制遗传发育进化树。结果表明,G0405为F基因Ⅰ型弱毒株,其F蛋白裂解位点的序列为112G-K-Q-G-R-L117,符合NDV弱毒株的序列特征,与NDV经典的致病力测定方法(MDT、ICPI)判定结果相一致。将G0405与国内外部分NDV强、弱毒株的F基因编码区1654bp核苷酸序列与推导的F蛋白N-末端551个氨基酸序列的同源性进行比较,结果表明G0405与其它NDV毒株的F基因核苷酸序列的同源性在87.8%~96.1%之间,氨基酸序列的同源性在89.5%~98.4%之间。通过免疫原性测定、同群饲养扩散试验、不同胚源扩增后对雏鹅的免疫对比试验、与Lasota和V4疫苗株的免疫效力比较试验、攻毒保护试验等,对G0405的免疫效果进行观察研究。结果表明,G0405具有较好的免疫原性,能刺激鹅群产生较高的抗体水平。免疫后第5d开始产生抗体,并呈现上升趋势,12d后抗体水平达到最高值(7.2Log2)。水平扩散能力较强,能够产生整齐的抗体滴度,利于进行免疫监测和免疫程序的制定。病毒在鹅胚与鸡胚内进行增殖后免疫鹅群,前者能够产生相对较好的抗体水平。G0405免疫效果略高于V4,但低于Lasota商品疫苗株。攻毒试验表明,G0405毒株、Lasota、V4疫苗毒株均能抵抗基因Ⅶ型鹅源NDV强毒株JS0305的攻击。由此可见,分离株G0405作为一株新的ND疫苗候选株,具有应用和推广的前景。