MCP-1在系统性红斑狼疮的表达及其对人肾系膜细胞表达TWEAK、Fn14、TGF-β1和IL-6的影响

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目的:1探讨血浆单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)与系统性红斑狼疮(SLE)肾脏受累的相关性。2观察MCP-1对人肾系膜细胞(HRMCs) TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6表达的影响,及MCP-1在狼疮肾炎(LN)病理过程中可能的作用机制。方法:1酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测54例SLE患者(其中LN患者40例;nLN患者14例)和正常人22例,并分析血浆MCP-1水平与系统性红斑狼疮疾病活动指数(SLEDAI)积分以及肾脏损伤指标的相关性。2体外培养HRMCs,分别用不同浓度的MCP-1(5ng/ml,25ng/ml,50ng/ml,100ng/ml)作用72h和100ng/ml MCP-1作用不同的时间(24h,48h,72h),应用实时荧光定量聚合酶链反应检测TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6mRNA表达。HRMCs细胞爬片,给予100ng/ml MCP-1作用72h,免疫组化检测TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6蛋白的表达变化。结果:1SLE患者血浆MCP-1水平高于正常人对照(P<0.01);LN患者亦高于正常人对照组(P<0.01);SLE患者血浆MCP-1水平与SLEDAI(r=0.381,P<0.01)呈明显的正相关;LN患者血浆MCP-1与SLEDAI有明显的相关性(r=0.408,P<0.01);血浆MCP-1水平与肾脏损伤指标尿蛋白(r=0.563,P<0.001)、尿白细胞(r=0.251,P<0.05)和尿NAG (r=0.587,P<0.001)呈正相关。2实时荧光定量聚合酶链反应的结果显示:在一定范围内随着MCP-1浓度的升高,TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6mRNA在HRMCs表达量逐渐增加;各处理组与对照组比较有统计学差异(均P <0.05);5ng/ml MCP-1作用时Fn14mRNA表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同浓度MCP-1各组间两两比较,差异亦有统计学意义(均P<0.05);一定范围内随着100ng/ml MCP-1作用的时间延长,TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6mRNA在HRMCs表达量亦逐渐增高,各处理组与对照组比较有统计学差异(均P <0.05);其余各时间段MCP-1分别比较,差异有统计学意义(均P<0.05)。3免疫组化的分析提示:TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6平均光密度实验组分别高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论:1SLE患者血浆MCP-1水平明显升高,与疾病活动度和肾脏受累相关,可作为LN活动性指标。2MCP-1能够在一定范围内呈剂量-时间依赖性促进TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6基因在HRMCs的表达。3MCP-1能够促进TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6蛋白在HRMCs的表达。4MCP-1可能通过上调细胞因子TWEAK、Fn14、TGF-β1、IL-6在HRMCs的表达参与了LN的病理过程。
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