从山西汾阳混交林土壤中分离到一株能在菌核内积累类胡萝卜素的青霉PT95菌株。分别观察了PT95菌株在查氏酵母膏琼脂（CYA）、麦芽汁琼脂（MEA）、25%甘油硝酸盐琼脂（G25N）和查氏琼脂（CA）上的菌落特征和个体形态特征。结果表明:PT95菌株在CYA培养基上25℃培养7d后能形成由大量的菌核和少量分生孢子构成的菌落,菌落表面呈放射状的沟纹和皱缩;菌核区颜色为粉红色,后变为深红色,产孢区颜色为青灰色;菌核球形或不规则形,直径约300μm;帚状枝为严格单轮生,分生孢子梗生自基质或气生菌丝;菌丝分枝较少;瓶梗3～8个轮生,安瓿形,排列较紧密,8μm～10μm×1.5μm～2.5μm;分生孢子椭圆形,长轴2.5μm～3.0μm。在CYA培养基上37℃不生长,5℃偶尔生长。经检索,PT95菌株属于汤姆青霉系。 比较了CTAB、SDS-CTAB和氯化苄这3种DNA提取方法提取青霉DNA的效果。实验结果表明:CTAB法和SDS-CTAB法只能适合于部分青霉菌株的DNA提取。另外一些菌株则提取不出谱带清晰的DNA。而氯化苄法适合于供试的所有青霉菌株的DNA提取,所有菌株的DNA凝胶电泳图谱带清晰,效果很好。同时研究比较了液氮研磨和提取液的pH值对氯化苄法提取DNA效果的影响。 运用RAPD技术对PT95菌株、4株PT95的突变株和6株标准青霉菌株进行了比较。从70个10bp引物中筛选出13个有效引物,用于所有供试菌株基因组DNA样品的扩增。这13个引物对11株供试菌株均能扩增出清晰的谱带。对RAPD结果进行聚类分析,构建了各供试菌株基因型的亲缘关系图。从聚类图上可以看出,PT95菌株与同属汤姆青霉系的3种标准菌聚为一类,而产黄青霉、娄地青霉和嗜松青霉聚为另一类,这与形态分类的结果相一致。但PT95菌株在电泳图谱上与汤姆青霉系的3种已知标准菌均有一定的差异,根据聚类图可以清楚地将PT95菌株与其他菌株分开,这说明PT95菌株不同于任一汤姆青霉系的已知菌,很可能是一新种,有待进一步研究。 初步研究了氧胁迫和外源β-胡萝卜素对青霉PT95菌株菌核分化和类胡萝卜素产率的影响。在本实验中,光照和培养基中加Fe³⁺作为高氧胁迫的培养条件,黑暗作为低氧胁迫的培养条件。结果表明,在培养基