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以7个F1石竹品种和一系列已混杂种子为试材,通过系谱法选育自交系及花药培养选育双单倍体,以期得到符合育种目标的纯系。 系谱法选育自交系: 1.采用系谱法对各入选株系进行套袋隔离并辅助授粉,连续自交选育得到了100多个不同世代的株系。其中S3代株系有H-44-1,H-44-2,H-44-3,H-56-1,H-58-1,H-58-2,H-58-9,H-68-1,H-94-1,H-102-1,wh-14-8,wh-14-16,wh-14-17系列共73株,此外还有H-59,H-67,H-69,H-82,H-103,Pl-1,Pl-2,Pl-3等S2代60余株。 2.开花生物学的观察和分析。一天中花粉活力最高时段为10时至13时;不同的花朵开放状态的花粉活力以雄蕊刚散粉时为最高。讨论花粉萌发影响因素表明,蔗糖浓度30%和硼酸浓度0.01%萌发力最佳,不同蔗糖和硼酸浓度及其交互作用差异显著。 3.部分遗传规律的分析与研究。对混杂株系主要性状进行分析表明:叶型、株幅、株高的变异系数较大。对各品种的13个性状进行相关分析表明:在花部观赏性状与营养性状的相关性中,花径与主茎粗负相关,相关性显著,盛期花数与分枝数、主茎粗的相关系数很大,相关性显著;在与生殖性状的相关性中,花径与花丝长度负相关,相关性极显著,盛期花数与子房长度负相关,与花丝长度为正相关,两个相关系数均达到0.05的显著水平;基部叶和顶部叶的叶长与叶宽之间都存在很大相关性,而且都达到显著检验水平。 花药培养的初步研究: 1.诱导愈伤组织培养基的筛选。处于单核晚期至双核早期的小孢子,在不同基本培养基中以MS培养基产愈率最高;蔗糖浓度以3%为好;不同品种的诱导率有一定差异,但都以MS+2,4-D2.0mg/L+BAP1.0mg/L效果最好。 2.分化培养基的探讨。来源于培养基MS+8%蔗糖+2,4-D2.0mg/L+BAP1.0mg/L的愈伤组织,其状态为浅绿色、紧凑颗粒状,在分化培养基MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L中最具分化潜力。2,4-D不宜用于分化培养,TDZ对愈伤分化效果不佳,不同时间的低温处理多次继代的愈伤组织,对分化率没有作用。 3.增殖和生根培养基。增殖培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L为好;生根培养基为1/2MS+NAA0.1mg/L或1/2MS+NAA0.2mg/L。 4.花药培养植株的倍性鉴定。对得到的16株花药培养植株进行倍性鉴定,发现7株为二倍体,8株为四倍体,1株为嵌合体。