【摘 要】
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目的:探讨不同浓度PM2.5对人正常鼻粘膜上皮细胞紧密连接蛋白Occludin分布及表达的影响。方法:体外培养正常人鼻黏膜上皮细胞系（HNEpC）,并用不同浓度PM2.5分别干预细胞24、48小
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目的:探讨不同浓度PM2.5对人正常鼻粘膜上皮细胞紧密连接蛋白Occludin分布及表达的影响。方法:体外培养正常人鼻黏膜上皮细胞系（HNEpC）,并用不同浓度PM2.5分别干预细胞24、48小时,采用CCK-8法检测细胞活性,选取200μg/ml、400μg/ml、500μg/ml三个浓度的PM2.5作为实验组干预细胞;采用免疫荧光法、Western-Blot及实时荧光定量PCR分别检测PM2.5干预后细胞紧密连接蛋白Occludin的蛋白分布、表达及相关mRNA水平变化。结果:与对照组相比,24h、48h不同浓度PM2.5干预鼻粘膜上皮细胞后细胞活性均降低(F24h=36.25、F48h=20.26,P<0.001),且24h、48h细胞活性与PM2.5浓度呈负相关;免疫荧光法检测发现,对照组细胞为圆形,排列紧密,Occludin呈蜂窝状,分布均匀,连接紧密;200μg/mlPM2.5组较对照组细胞形态稍变长,Occludin分布无明显改变;400μg/mlPM2.5组,细胞数量较前略减少,细胞形态较前更为细长,细胞膜及细胞连接间出现少量空泡;500μg/mlPM2.5组,视野中细胞数量明显减少,形态较前更为细长,呈长梭形,细胞膜出现大量空泡,且Occludin结构断裂;Western-Blot、实时荧光定量PCR检测发现,与对照组相比,除24h-200μg/mlPM2.5组外,其余各组Occludin及相关mRNA相对表达量均下调,24h、48h Occludin表达量呈时间-效应关系。结论:PM2.5可降低正常人鼻黏膜上皮细胞HNEpC活性、同时可以使细胞紧连接Occludin分布、表达及相关mRNA表达降低,这可能是导致过敏性鼻炎的发生的一个机制。
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