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目的:(1)建立大鼠中动脉梗死(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)模型,观察通督调神针灸预处理对脑缺血再灌注大鼠相关微小RNA(microRNAs,miRNAs)、基质金属蛋白9(Matrix Metallo Preteinases-9,MMP-9)、水通道蛋白4(aquaporin-4,AQP4)表达的调控作用。(2)观察通督调神针灸预处理对脑缺血再灌注大鼠相关miRNA、MMP-9、AQP4表达与缺血预适应的关联性。(3)观察相同疗程通督调神针刺与艾灸之间调控脑缺血再灌注大鼠相关miRNA、MMP-9、AQP4表达的差异性。(4)比较电针预处理和艾灸预处理对脑缺血再灌注大鼠脑水肿的保护效果,为临床选用不同治疗方法提供实验室依据;方法:选择清洁级月龄3-4个月健康雄性Wistar大鼠130只,体重250g-300g,经1周适应性饲养后开始实验。大鼠的饲养环境湿度45-65%,温度22-25℃。电脑随机数字法分为A电针预处理组(30只)、B艾灸预处理组(30只)、C阿司匹林预处理组(30只)、D模型组(30只)、E空白对照组(10只)。正常组断头取脑并保存脑组织;模型组动物于再灌注后24h,进行神经功能评分,然后断头取脑保存脑组织;电针预处理组进行电针治疗,每次20min,每天一次,共治疗7d;艾灸预处理组用清艾条悬灸,每次20min,每天一次,共治疗7d;阿司匹林预处理组阿司匹林:10mg/kg,溶于2ml生理盐水中灌胃,每天一次,治疗7d。疗程结束后各组进行脑缺血再灌注模型制作,于再灌注后24h,进行神经功能评分,之后断头取脑保存脑组织。取各组大鼠脑组织进行组织学观察,观察皮质区相关miRNA、MMP-9、AQP4的表达。结果:(1)模型组、阿司匹林预处理组、艾灸预处理组、电针预处理组神经行为学评分均明显提高。与正常组相比,各组神经行为学评分差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,各预处理组评分差异均有统计学意义(P<0.01);与阿司匹林组预处理相比,电针组预处理和艾灸预处理组评分差异有统计学意义(P<0.01);与艾灸组相比,电针预处理组评分差异有统计学意义(P<0.01)。结果表明:1)、MCAO大鼠模型制备成功;2)、阿司匹林预处理、艾灸预处理、电针预处理均可降低缺血再灌注大鼠神经行为学评分,且电针预处理效果优于阿司匹林和艾灸预处理。(2)模型组、阿司匹林预处理组、艾灸预处理组、电针组预处理脑水含量均明显提高。与正常组相比,各组脑水含量差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,各预处理组脑水含量差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与阿司匹林预处理组相比电针预处理组和艾灸预处理组脑水含量差异有统计学意义(P<0.01, P<0.05);与艾灸预处理组相比,电针预处理组脑水含量差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明:阿司匹林预处理、艾灸预处理、电针预处理均可降低缺血再灌注大鼠脑水含量,电针和艾灸预处理效果优于阿司匹林预处理。(3)与模型组相比,各预处理组脑梗死体积均明显降低。与模型组相比,各预处理组脑梗死体积差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与阿司匹林预处理组相比电针预处理组和艾灸预处理组脑梗死体积差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与艾灸预处理组相比,电针预处理组脑梗死体积差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明:阿司匹林预处理、艾灸预处理、电针预处理均可降低缺血再灌注大鼠脑梗死体积,且电针和艾灸预处理效果明显优于阿司匹林预处理。(4)模型组、阿司匹林预处理组、艾灸预处理组、电针预处理组miRNA290、miRNA494相对表达量均明显降低。与正常组相比,各组miRNA290、miRNA494相对表达量差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,各预处理组相对表达量差异均有统计学意义(P<0.01);与阿司匹林预处理组相比电针组和艾灸组相对表达量差异有统计学意义(P<0.01);与艾灸预处理组相比,电针预处理组相对表达量差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明:阿司匹林预处理、艾灸预处理、电针预处理均可提高缺血再灌注大鼠miRNA290、miRNA494相对表达量,电针预处理和艾灸预处理较阿司匹林预处理效果更显著。(5)模型组、阿司匹林预处理组、艾灸预处理组、电针预处理组miRNA664相对表达量明显升高。与正常组相比,各组miRNA664相对表达量差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,各预处理组相对表达量差异均有统计学意义(P<0.01);与阿司匹林预处理组相比电针预处理组和艾灸预处理组相对表达量差异有统计学意义(P<0.01, P<0.05);与艾灸预处理组相比,电针预处理组相对表达量差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明:阿司匹林预处理、艾灸预处理、电针预处理均可降低缺血再灌注大鼠miRNA664相对表达量,电针预处理和艾灸预处理效果优于阿司匹林预处理。(6)模型组、阿司匹林预处理组、艾灸预处理组、电针预处理组AQP4、MMP9相对表达量均明显提高。与正常组相比,各组AQP4、MMP9相对表达量差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,各预处理组相对表达量差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与阿司匹林预处理组相比电针预处理组和艾灸预处理组相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);与艾灸预处理组相比,电针预处理组相对表达量差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结果表明:阿司匹林预处理、艾灸预处理、电针预处理均可降低缺血再灌注大鼠AQP4、MMP9相对表达量,电针预处理效果更显著。结论:(1)通督调神针灸预处理能显著降低脑缺血再灌注大鼠神经行为学评分、脑水含量,减少脑梗死体积,是预防脑梗死的有效方法。(2)通督调神针灸预处理能明显提高脑缺血再灌注大鼠miRNA290、miRNA494相对表达量,降低miRNA664相对表达量,诱导脑缺血耐受,形成脑保护,这可能是通督调神针灸预处理脑缺血再灌注的作用机理。(3)通督调神针灸预处理能够有效降低缺血再灌注大鼠AQP4、MMP9相对表达量,减轻脑水肿。(4)通督调神针灸预处理可能通过调控miRNA290、miRNA494及miRNA664的表达降低AQP4、MMP9相对表达量,诱导脑缺血耐受,减轻脑水肿。可能是通督调神针灸预处理脑保护机制之一。(5)通督调神针灸预处理能有效改善脑缺血再灌注,形成脑保护,且通督调神电针预处理效果优于通督调神艾灸预处理。