整合素与钙通道协同调节人肾小管上皮细胞转分化过程的研究

来源 :华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guigui1998
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目的用转化生长因子(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化,探讨转分化过程中可能的细胞信号转导机制;丹酚酸B(SA-B)对HK-2细胞转分化过程的干预作用。方法TGF-β1(5ng/ml)刺激HK-2,用特异性细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059(25μmol/L)、钙通道拮抗剂Nifedipine(10μmol/L)及丹酚酸B(SA-B)(10μmol/L)处理;于不同时间段分用免疫荧光、S-P法和免疫印迹的方法检测黏着斑激酶(FAK)、整合素β1(β1-Integrin)。结果①相比空白组TGF-β1成功诱导HK-2转分化;②TGF-β1刺激15min后FAK-Tyr397磷酸化增强,60min达顶峰。相比TGF-β1对照组,PD98059使FAK-Tyr397的磷酸化减弱(P<0.05)而Nifedipine无明显抑制作用(P>0.05),PD98059与Nifedipine协同作用明显(P<0.01),SA-B具有同样抑制作用(P<0.01);③相比对照组,PD98059、SA-B使FAK蛋白表达呈时间依赖性减弱(前者P<0.05;后者P<0.01), PD98059与Nifedipine协同作用明显(P<0.01);④PD98059及Nifedipine均呈时间依赖性抑制β1-Integrin表达(P<0.05),两者协同作用明显(P<0.01);SA-B有效抑制β1-Integrin表达(P<0.01)。结论TGF-β1与Integrin信号通路之间通过ERK/FAK相互作用;钙通道参与调节FAK鳞酸化及FAK与β1-Integrin的表达;SA-B可能通过以上通路有效调节人肾小管上皮细胞转分化过程。
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