高效液相色谱法检测孕妇血清中BBP、DBP的含量及其可能的毒理学意义

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邻苯二甲酸酯类化合物(phthalate esters, PAEs)约有l4种,其中邻苯二甲酸丁苄酯(butyl benzyl phthalate,BBP)、邻苯二甲酸二正丁酯(di-n-butyl phthalates,DBP)、邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di(2-ethylhexyl) phthalate,DEHP)等在内的八种PAEs已被世界野生动物基金会(WWF)确定为环境激素类污染物。PAEs作为增塑剂,主要用于塑料制品的生产加工过程中;此外涉及的PAEs产品还有化妆品、指甲油、洗涤剂、农药、医疗用品等。在产品的生产过程中,PAEs并没有与塑料共价结合,因此随着时间的推移,PAEs会从塑料释放到环境中,广泛存在于水体、土壤、大气和生物体中,甚至进入食物供应链,危害人类的健康。以往有关PAEs对健康影响的研究大多集中在对生殖发育方面,主要是动物实验,而人群资料相对较少,尤其关于孕妇在PAEs的环境暴露水平下对其自身以及胎儿的生长发育方面影响的研究更少。目前人群PAEs的暴露水平对男性生殖健康有很大的影响,但是孕妇在低水平PAEs暴露时可能会对后代产生神经行为方面的不良影响,因此有必要进行进一步研究。总所周知,在过去几十年里,男性精子数量的下降、生育能力下降与越来越多的PAEs污染有关。此外,1970到1993年流行病学调查发现美国男性尿道下裂和隐睾的发病率增加了1倍[1],睾丸癌和精子质量下降等问题也逐年增加。研究还发现这些异常与PAEs暴露之间存在明显的相关性[2]。而PAEs污染对孕妇以及下一代的影响报道不多见。PAEs作为全球性有机污染物,人类已经时时刻刻在接触这样污染物,而育龄期,尤其是孕产期妇女作为一个特殊人群,应该值得特别关注。近年来,PAEs的神经发育毒性也逐渐受到关注。体外实验发现PAEs可以透过大鼠卵黄囊直接攻击胚胎细胞,卵黄囊生长发育和血管分化明显受抑,胚胎生长发育所需营养物质得不到供应,造成胚胎缺氧和新陈代谢紊乱,从而抑制胚胎发育。由于神经系统对能量和氧供应减少尤其敏感,因此PAEs对神经系统发育的潜在毒性的研究不容忽视。动物实验也表明,DEHP在相对的低剂量时影响小鼠的神经行为和大鼠脑芳香化酶的活性[3-4]。本教研室前期通过体内实验和和体外实验对PAEs的研究,发现妊娠期接触BBP、DBP对大鼠胚胎产生具有一定的胚胎发育毒性,同时BBP还对F1雄性大鼠的发育有一定的影响,低剂量组雄性(50mg/kg)仔鼠的平面翻正实验、空中翻正实验、开场实验以及Morris水迷宫实验结果与对照组相比,差异均具有显著性,高剂量组(750mg/kg)雄性仔鼠仅空中翻正实验、悬崖回避实验与开场实验结果出现阳性变化[5];而雄性大鼠在相对低水平(25mg/kg)暴露DBP时,雄性大鼠的学习记忆能力明显降低[6]。本实验拟通过建立用高效液相色谱检测孕妇血清中邻苯二甲酸酯类的含量的方法,选择156例孕妇血样,检测孕妇血清BBP、DBP的含量,分析其含量与胎儿体重、体长等指标的相关性,以了解在一般环境条件下,孕妇血清BBP、DBP含量是否会影响胎儿的生长发育并为制定PAEs在各种介质的安全限值提供依据。
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