知葛通脉颗粒治疗糖尿病周围神经病变的疗效和机制研究

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目的:1.探讨知葛通脉颗粒治疗糖尿病性周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的临床疗效及对相关神经活性因子(NGF、IGF-1、VEGF)的影响。2.探讨知葛通脉颗粒对大鼠坐骨神经传导速度、相关神经活性因子(NGF、IGF-1、VEGF)的影响及作用机制。方法:1.选取上海中医药大学附属上海市中西医结合医院2017年1月至2018年10月收治的90例DPN患者为研究对象,根据随机数字法分为对照组和观察组,每组各45例。其中对照组患者给予甲钴胺片,观察组患者给予知葛通脉颗粒治疗。比较两组患者的临床疗效;比较两组患者治疗前后中医证候积分、多伦多评分、两侧胫神经传导速度、相关神经活性因子(NGF、IGF-1、VEGF)水平、血糖(FBG、2 h PG、Hb A1C)和血脂(TC、TG、LDL-C、HDL-C)变化情况、血常规(WBC、PLT、Hb)、肝功能(ALT、AST)、肾功能(Cr、BUN)指标。2.选取SPF级健康SD雄性大鼠60只为研究对象,随机选取其中10只大鼠作为正常对照组,剩余的50只SD大鼠进行DPN造模,造模成功后随机分成5组:模型组、低、中、高剂量知葛通脉颗粒组和甲钴胺组,每组10只,观察各组大鼠实验期间的一般情况并进行血糖监测。比较各组大鼠治疗后足底光热刺激痛阈时间、坐骨神经传导速度及潜伏期、血清相关神经活性因子(NGF、IGF-1、VEGF)水平。然后,利用Western blot和PCR法分别检测各组大鼠坐骨神经中NGF、IGF-1、VEGF、Trk A、p75NTR、p-ERK、Nrf2、HO-1、γ-GCS的表达情况。结果:1.临床研究:DPN患者经过4周治疗,观察组的总有效率(93.33%)显著高于对照组(75.56%),差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者的中医证候积分、多伦多评分、两侧胫神经MCV、SCV传导速度、血清NGF、IGF-1、VEGF水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者的中医证候积分、多伦多评分、血清VEGF水平较治疗前均显著降低,两侧胫神经MCV、SCV传导速度、血清NGF、IGF-1水平较治疗前均显著升高,且观察组显著优于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前后血糖水平(FBG、2 h PG、Hb A1C)、血脂水平(TC、TG、LDL-C、HDL-C)、血常规指标、肝功能指标、肾功能指标相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。2.实验研究:与正常对照组相比,模型组大鼠足底光热刺激痛阈时间、坐骨神经传导潜伏期均显著延长,坐骨神经传导速度、血清NGF、IGF-1水平、坐骨神经组织中NGF、IGF-1、Trk A、p-ERK、Nrf2、HO-1、γ-GCS的蛋白表达量及m RNA水平均显著降低,坐骨神经组织中VEGF、p75NTR的蛋白表达量及m RNA水平均显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,各药组大鼠足底光热刺激痛阈时间、坐骨神经传导潜伏期均显著缩短,坐骨神经传导速度、血清NGF、IGF-1水平、坐骨神经组织中NGF、IGF-1、Trk A、p-ERK、Nrf2、HO-1、γ-GCS的蛋白表达量及m RNA水平均显著升高,坐骨神经组织中VEGF、p75NTR的蛋白表达量及m RNA水平均显著降低,且中、高剂量知葛通脉颗粒组均显著优于甲钴胺组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.知葛通脉颗粒可以改善DPN患者的临床症状及神经传导功能。2.知葛通脉颗粒能够调控NGF、IGF-1、VEGF、Trk A、p75NTR的表达促进神经细胞存活与分化。3.知葛通脉颗粒通过调控p-ERK-Nrf2信号通路及其下游分子HO-1、γ-GCS的表达,促进抗氧化应激作用,改善神经细胞功能状态,发挥神经保护作用。
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