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当机体受到病毒感染时,免疫细胞将通过模式识别受体识别病毒成分并活化下游的信号通路,从而表达I型干扰素(Interferon, IFN)和促炎症细胞因子。其中,I型干扰素在激发抗病毒免疫应答中发挥关键作用,并且其表达受机体精确调控,而病毒本身也能干预抗病毒信号通路,实现其对机体抗病毒天然免疫的逃逸进而增强自身的复制。病毒干预和逃逸机体抗病毒天然免疫应答的机制是天然免疫研究的重大科学问题。此外,miRNA在天然免疫应答的调控中发挥关键作用,病毒在miRNA层面与机体的相互作用和机制目前受广泛关注。据此,本研究拟通过探求在病毒感染过程中胞内表达改变的miRNA并进一步研究其作用机制,以寻求病毒通过调控机体miRNA的表达进而干预抗病毒天然免疫应答和实现免疫逃逸的分子机制。我们先期通过高通量miRNA芯片筛选,发现在RNA病毒VSV感染小鼠腹腔巨噬细胞的过程中,miR-27a的表达显著降低。进一步研究发现,miR-27a的表达受到IFN/JAK/STAT1信号通路的调控,并且依赖于RUNX1蛋白。miR-27a的表达下调将显著抑制病毒诱导的I型干扰素产生进而增强病毒自身的复制。在分子机制研究中,通过小鼠全基因组表达谱芯片发现,miR-27a能够靶向作用于唾液酸凝集素受体Siglecl和TRIM家族的E3泛素化连接酶TRIM27,过表达miR-27a后能在mRNA和蛋白水平上降低Siglecl和TRIM27的表达。进一步研究发现,Siglecl能与DAP12相互作用,进而活化酪氨酸磷酸酶SHP2,活化的SHP2能招募E3泛素化连接酶TRIM27后作用于TBK1,使TBK1上251位和372位的赖氨酸残基发生K48位连接的泛素化修饰进而促进其在蛋白酶体中降解,最终导致负向调控I型干扰素的表达。我们构建了miR-27a-sponge的转基因小鼠,在体内进一步验证miR-27a的功能,当腹腔注射VSV后,与对照组相比,miR-27a-sponge小鼠血清中的IFN-β的表达量显著降低,HE染色发现,小鼠肺脏中炎症细胞浸润更明显,肝、脾、肺中VSV病毒的复制更强。由此,我们证明了病毒感染诱导表达下调的miR-27a能靶向增强负调控因子Siglecl和TRIM27的表达,促进TBK1的降解,进而反馈抑制I型干扰素的表达和增强病毒自身的复制,即病毒利用miR-27a来实现自身的免疫逃逸,因此我们发现了一种病毒逃逸抗病毒天然免疫的新机制。