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目的:根据“形寒饮冷则伤肺,劳倦内伤而耗阳气”的中医理论,对烟熏、冰水游泳、服用冰水、服用冰他吧唑溶液等造模因素进行二因素或三因素组合,比较四组造模复合因素对肺阳虚证鼠模型的影响。
方法:①四种造模因素不同组合制备肺阳虚小鼠模型的比较研究:ICR小鼠70只,随机分为4个造模组。二因素组合:烟熏+冰泳组(G2)、烟熏+服用冰水组(G3);三因素组合:烟熏+冰泳+服用冰水组(G4)、烟熏+冰泳+服冰他吧唑组(G5),每组14只,连续造模10天,设立正常对照组(G1)。G1不做任何处理。G2、G3、G4、G5各模型组同时置自制烟熏箱内烟熏,香烟总计20支,时间为20 min/d;之后,将G2、G4、G5置冰水中游泳时间为2~3min/d;G3、G4分别自由饮用冰水,G5饮用冰他吧唑溶液(O.1mg/ml)。以上处理,每日1次,连续10d。观察其一般体征(喘鸣、呼吸急促、精神萎靡、毛发零乱、缺少光泽),测定抓力、自主活动、肺组织和血清MDA、SOD、血常规等。
②复合因素制备肺阳虚大鼠模型的探讨大:SD大鼠20只,雌雄各半,体重200-220g。分组:正常对照组、模型组,模型组香烟烟熏(20 min)+游泳30 min+冰水游泳(10 min)+服用他吧唑溶液(0.1mg/ml),35d后,观察是否出现咳嗽、喘鸣、呼吸急促,并先后出现少动、反应迟钝、精神萎靡、毛发零乱、脱落、缺少光泽等症状,且以后者为甚。同时可观察到肺阳虚组大鼠扎堆、舌青紫等症状和体征,并测定各项指标(自主活动、抓力、血常规、血流变),以确定模型是否成功建立。
③四种造模因素不同组合制备肺阳虚大鼠模型的比较研究:SD大鼠50只,随机分为4个造模组。二因素组合:烟熏+冰泳组(G2)、烟熏+服用冰水组(G3);三因素组合:烟熏+冰泳+服用冰水组(G4)、烟熏+冰泳+服冰他吧唑组(G5),每组10只,连续造模30天,设立正常对照组(G1)。G1不做任何处理。G2、G3、G4、G5各模型组同时置自制烟熏箱内烟熏,香烟总计40支,时间为30 min/d;之后,将G2、G4、G5置冰水中游泳时间为10min/d;G3、G4分别自由饮用冰水,G5饮用冰他吧唑溶液(0.1mg/ml)。以上处理,每日1次,连续10d。观察其一般体征(喘鸣、呼吸急促、精神萎靡、毛发零乱、缺少光泽),测定抓力、自主活动、肺组织NO、MDA、SOD、血常规、血流变、肺功能等。
结果:①四个模型组小鼠均出现体重增长缓慢,自主活动减少,抓力降低,心、肺指数增加。其中三因素组合对体征(咳声低弱、皮毛潮湿、乏力少动)以及肺组织和血清MDA、SOD的影响,优于二因素组合;复合造模因素中,增加冰泳(烟熏+冰泳、烟熏+冰泳+服用冰水、烟熏+冰泳+服冰他吧唑)优于服用冰水(烟熏+服用冰水),抓力下降、心肺指数升高更明显;烟熏+冰泳+服用冰水可能是最佳造模复合因素。
②造模后期,大鼠出现喘鸣、呼吸急促、畏寒少动、精神萎靡、毛发凌乱无光泽、饮水量下降等症状;模型大鼠体重、自主活动次数、背部温度、肛温、抓力呈显著性下降(P<0.05);红细胞数量、低切变率下的全血粘度、全血还原粘度、红细胞刚性指数、电泳指数均显著性升高(P<0.05)。
③四个模型组大鼠均出现体重增长缓慢,自主活动减少,抓力、体重、背温呈显著性下降(P<0.05),心、肺指数、气道阻力、低切变率下的全血粘度、全血还原粘度、红细胞刚性指数、变形指数均显著性升高(P<0.05)。其中三因素组合对体征(咳声低弱、皮毛潮湿、乏力少动)以及肺组织MDA、SOD的NO影响优于二因素组合;烟熏+冰泳+服用冰水可能是最佳造模复合因素。
结论:
①采用烟熏、冰水游泳、服用冰水、服冰他吧唑等二因素或三因素组合造模,大、小鼠均表现出不同程度的肺阳虚症状,且造模因素中冰水游泳效果优于服用冰水。冰水游泳组优于服用冰水组,其中三因素(烟熏+冰泳+服用冰水)造模更接近中医临床,这可能是形寒、劳倦与饮冷共同使然。
②三因素造模优于两因素造模,能较好的与肺阳虚之临床症状相吻合,表明该方法是可行的。