【摘 要】
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目的 探讨碳酸司维拉姆对慢性肾衰竭大鼠高磷血症导致血管钙化的作用及机制。方法 将40只250300g健康成年雄性SD大鼠进行数字标号,随机将其分为4组,每组10只,包括假手术组、模型组、碳酸钙组、碳酸司维拉姆组。假手术组仅行肾脏包膜切除,术后给予普食及净水喂养;余30只行5/6肾切除,造模采用两步法。术后均先给予普食及净水喂养,共计4周,抽取尾静脉血检测肌酐、尿素氮。然后肾切除组随机分为3组,具体
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目的 探讨碳酸司维拉姆对慢性肾衰竭大鼠高磷血症导致血管钙化的作用及机制。方法 将40只250300g健康成年雄性SD大鼠进行数字标号,随机将其分为4组,每组10只,包括假手术组、模型组、碳酸钙组、碳酸司维拉姆组。假手术组仅行肾脏包膜切除,术后给予普食及净水喂养;余30只行5/6肾切除,造模采用两步法。术后均先给予普食及净水喂养,共计4周,抽取尾静脉血检测肌酐、尿素氮。然后肾切除组随机分为3组,具体方案如下:1)模型组（n=10）:仅给予高磷饮食（磷1.2%,钙1.6%,维生素D1IU/kg）喂养10周。2)碳酸司维拉姆组（n=10）:给予高磷饮食的同时给予碳酸司维拉姆（72mg/kg,3/日）喂养10周。3)碳酸钙组（n=10）:给予高磷饮食的同时给予碳酸钙（150mg/kg,1/日）喂养10周。10周后,再次全麻大鼠,抽取下腔静脉全血,用生化分析仪测定大鼠血磷、血钙,酶联免疫吸附法测定C反应蛋白（C reaction protein,CRP）、白介素-6（interleukin-6,IL-6）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）。抽血后留取大鼠胸主动脉全段,将其分为三段,上段用10%甲醛固定后石蜡包埋行Von Kossa染色评估钙化情况。中段在-80℃下封存行real-time PCR检测Runt相关转录因子2（runt-related transcription factor 2,Runx2）及Krueppel样因子5（krueppel-like factor 5,KLF5）m RNA的表达,免疫组化检测KLF5、Runx2表达。下段液氮保存用于检测组织钙含量。留取肾脏组织用HE染色评估肾脏病变。结果 1假手术组及肾切除组大鼠肾功能变化:5/6肾切除组的尿素氮及肌酐水平均高于假手术组,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。2各组大鼠钙磷水平比较:四组间血磷水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）;两两比较显示,模型组、碳酸钙组及碳酸司维拉姆组血磷水平均高于假手术组,（P<0.05）,模型组血磷水平高于碳酸钙及碳酸司维拉姆组（P<0.05）,碳酸钙组血磷水平高于碳酸司维拉姆组（P<0.05）;四组间血钙水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）,其中,假手术组最高,模型组最低,碳酸司维拉姆组低于碳酸钙组,组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。3肾脏病理:光镜下:假手术组大鼠肾小球、肾小管及肾间质未见显著异常。模型组、碳酸钙及碳酸司维拉姆组肾小球均发生不同程度的硬化性改变,肾小管上皮细胞脱落、损伤,肾间质有炎细胞浸润伴纤维样改变。4主动脉钙盐沉积:Von Kossa染色结果显示模型组主动脉出现严重钙化;碳酸钙组主动脉钙化程度低于模型组;碳酸司维拉姆组大鼠仅有个别大鼠出现钙化;假手术组大鼠主动脉未见明显钙化。5钙含量:四组钙含量比较,差异有统计学意义（P<0.05）。其中,模型组最高,假手术组最低,碳酸司维拉姆组的钙含量低于碳酸钙组,两两比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。6大鼠KLF5及Runx2表达:模型组、碳酸钙组及碳酸司维拉姆组KLF5及Runx2表达均高于假手术组（P<0.05）,碳酸司维拉姆及碳酸钙组大鼠主动脉Runx2、KLF5的表达较模型组明显降低（P<0.05）,碳酸司维拉姆组表达水平低于碳酸钙组（P<0.05）。7大鼠KLF5及Runx2m RNA表达:四组Runx2 m RNA、KLF5 m RNA表达水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）。其中,模型组最高,假手术组最低,碳酸司维拉姆组低于碳酸钙组,两两比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。8大鼠IL-6、CRP水平比较:四组间CRP、IL-6水平比较,差异有统计学意义（P<0.05）。其中,假手术组最低,模型组最高,碳酸司维拉姆组CRP、IL-6水平低于碳酸钙组,两两组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。9碱性磷酸酶:四组间ALP比较,差异有统计学意义（P<0.05）,其中,模型组最高,假手术组最低,碳酸钙组高于碳酸司维拉姆组,两两比较组间差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 1碳酸司维拉姆可延缓慢性肾衰竭高磷血症所致的血管钙化。2碳酸司维拉姆延缓血管钙化的作用明显优于碳酸钙。3碳酸司维拉姆通过降低KLF5和Runx2的表达来抑制血管钙化。图3幅;表11个;参107篇。
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