目的:通过研究不同剂量(10nM/L、50nM/L、100nM/L)抵抗素( resistin ) 对 大 鼠 肝 细 胞 糖 代 谢 关 键 酶 - 葡 萄 糖 激 酶( Glucoskinase ,GK ) 和 磷 酸 烯 醇 式 丙 酮 酸 羧 激 酶(Phosphoenolpyruvate carboxykinase ,PEPCK)活性及 mRNA 表达的影响,了解抵抗素对肝脏糖代谢的影响并初步探讨抵抗素在肝脏胰岛素抵抗形成中的作用及机制。 方法: 正常大鼠的肝细胞,不加 resistin 与加不同剂量的resistin(10nM/L、50nM/L、100nM/L)培养 24h。用 6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法、乳酸脱氢酶偶联比色法检测不同剂量 resistin 对 GK和 PEPCK 活性的影响;用 RT-PCR 检测 GK 和 PEPCK mRNA 表达水平的变化。 结果:(1)Resistin 浓度为 10nM/L、50nM/L 时,GK 活性与空白对照组相比无显著差异(P﹥0.05),PEPCK 活性明显升高(P﹤0.05);当 resistin 浓度上升为 100nM/L,GK 活性较空白对照组明显下降(P﹤0.05),而 PEPCK 活性升高更明显(P﹤0.01)。(2)RT-PCR 结果显示resistin 浓度为 10nM/L、50nM/L 时,GK 和 PEPCK mRNA 表达水平较空白对照组无显著差异(P﹥0.05);当 resistin 浓度为 100nM/L,GK mRNA表达水平(以β-actin 校正)显著降低,PEPCK mRNA 表达水平明显升高(P﹤0.05)。 结论:Resistin 浓度为 10nM/L、50nM/L 对大鼠肝细胞 GK 活性无