【摘 要】
：
番茄（Solanum lycopersicum）果实富含维生素、番茄红素等对人体有益的营养元素,是重要的蔬菜作物之一。因其基因组小、遗传背景清晰、容易遗传转化、突变体丰富、生长周期短以及具有果实等优点,番茄也是研究果实发育和逆境胁迫的模式系统。ERF（Ethylene Responsive Factor）转录因子属于AP2/ERF（APETALA2/Ethylene Responsive Fact
论文部分内容阅读
番茄（Solanum lycopersicum）果实富含维生素、番茄红素等对人体有益的营养元素,是重要的蔬菜作物之一。因其基因组小、遗传背景清晰、容易遗传转化、突变体丰富、生长周期短以及具有果实等优点,番茄也是研究果实发育和逆境胁迫的模式系统。ERF（Ethylene Responsive Factor）转录因子属于AP2/ERF（APETALA2/Ethylene Responsive Factor）家族中的一员,在植物生长发育及各种胁迫响应等过程中发挥重要作用。本研究以Micro Tom番茄为材料,克隆了SlERF.F4基因,进行生物信息学分析,并分析了SlERF.F4基因在番茄不同组织部位的表达水平,以及对外源激素和非生物胁迫的响应;利用原生质体瞬时转染方法对该蛋白进行了亚细胞定位;同时,构建了番茄SlERF.F4基因的过表达载体,通过农杆菌介导法获得了转基因番茄植株,分析了其果实成熟中的功能及对干旱胁迫的响应,初步明确了SlERF.F4基因的生物学功能。本研究主要结果如下:（1）生物信息学分析结果表明番茄SlERF.F4基因全长678 bp,编码225个氨基酸,具有典型的AP2/ERF转录因子家族特征。对其启动子序列进行分析,结果表明启动子中含有与光响应和激素应答等相关顺式作用元件。同源性分析中结果表明SlERF.F4和SlERF3具有较高氨基酸序列同源性。（2）利用qRT-PCR方法分析了番茄不同组织器官中的时空表达模式,结果表明SlERF.F4基因在花和果实中的表达量较高,表明SlERF.F4可能调控花和果实的发育。在不同逆境胁迫方法下处理番茄幼苗,结果显示SlERF.F4基因的表达受到干旱、盐胁迫、低温和高温的诱导。在不同的植物激素处理下,SlERF.F4基因受到ABA和BR的诱导表达,SA处理之后SlERF.F4基因的表达先降低后上升。以上结果表明SlERF.F4基因在转录水平上受非生物胁迫和激素的调控。（3）构建过表达载体pCambia1300-SlERF.F4-YFP,利用农杆菌介导法转化番茄,经潮霉素筛选后获得4株T0代阳性植株,自交留种2次,获得T2代纯合植株。两个转基因株系OE-6#和OE-7#中,SlERF.F4基因表达量各提高了2倍左右。与野生型相比,转基因植株变矮、果实数量减少、单株产量降低,成熟时间延长。同时分析了绿熟期MG（Mature Green）、破色期Br（Breaker）、破色期后4 d（Br+4）、破色期后7 d（Br+7）4个时期成熟相关基因的表达变化,结果表明两个转基因株系果实中成熟相关基因RIN、TAG、CNR、E4、E8、PG均受到不同程度的下调表达。（4）研究了SlERF.F4过表达和野生型植株在干旱胁迫中的响应,结果表明在干旱条件下转基因植株萎蔫程度降低,并具有较高的成活率,因此我们推测SlERF.F4在提高番茄植株的抗旱性方面可能具有一定的作用。以上结果表明SlERF.F4基因在番茄成熟过程中和应对干旱胁迫进程中发挥一定功能,为之后利用基因工程手段改良番茄品质和抗旱性提供理论依据。
其他文献
对虾分级是对虾捕捞加工的第一道工序,是对虾品质区分和进行高效机械化自动剥壳的必备条件,分级精度影响到后续工序和分装质量。研究能够高效精准分级对虾的自动化设备,具有非常重要的意义。以南美白对虾作为研究对象,针对分级区间无法满足规范标准要求,分级精度较低,为保证分级精度需牺牲分级效率等问题,本文研究了对虾的尺寸特征和对辊式分级原理,分析影响分级精度和分级效率的关键技术问题,设计分级机关键装置、机构和控
目的:1.观察分析在大孔径特发性黄斑裂孔（Idiopathic Macular Holes,IMH）的手术治疗中,内界膜（internal limiting membrane,ILM）填塞与否对术后视功能、黄斑区微结构及闭合率的影响。2.观察黄斑区脉络膜厚度在特发性黄斑裂孔患者中的特点。方法:收集2018年9月至2020年10月入院手术治疗的特发性黄斑裂孔患者27例（27眼）,排除高度近视、眼外伤
目的：妊娠期由于孕妇体内激素水平的变化,免疫功能受到抑制,人乳头瘤病毒（HPV）的清除能力减弱。本文旨在探讨HPV感染与妊娠相关疾病的联系,为临床预防、诊疗提供依据。方法:检索2020年12月前PUBMED、EMBASE、Cochrane Library等英文数据库以及维普、万方、知网等中文数据库所发表的关于HPV感染与妊娠相关疾病的文献。通过End Note X9按照纳入及排除标准进行文献筛选,
化学防治是作物病害防治的主要手段,但由于病原物抗药性问题日趋严重,导致田间防效下降,因此在新农药上市之前有必要开展病原物对杀菌剂的室内抗药性风险评估,以指导农民科学用药。已有研究报道发现,植物病原菌在实验室条件下的抗性进化机制与田间抗性菌株间存在着遗传学的差异。造成这种差异的原因可能是来自诱变因子、环境条件以及其它生物影响因素等。所以亟待研究植物病原菌在室内的抗性机制,筛选到与田间抗性菌株抗性机制
钙受体蛋白（CAS）定位于植物叶绿体类囊体膜上,前期研究发现CAS基因功能的缺失会引起拟南芥叶片衰老及开花时间提前,这与植物缺氮表现的叶片黄化及开花提前的生理现象比较类似,CAS是否参与拟南芥根系氮肥的吸收、转运及利用,鲜有文献报道。为揭示CAS如何参与植物氮素调节和开花过程,本论文以拟南芥为材料,通过表型观察、生理及分子生物学等手段进行验证。主要结论如下:1.利用MEGA-X软件对40多种植物体
海洋和内陆渔业,包括水产养殖,是全球约8.2亿人的收入来源,涉及收获、加工、销售及分配等活动。我国作为水产养殖大国,亟需通过现代信息技术手段解决今后渔业产业发展面临的关键问题。对鱼类种类进行识别能够为渔业产业提供有利的技术支撑,同时对于水产品养殖、渔业加工产业、鱼类资源调查和保护生态方面都具有重要的应用价值。鱼类种类识别主要面临两个问题:第一,传统上利用人工识别加工会造成劳动强度大和识别率低等问题
玉米（Zeamays L.）是世界公认的最重要粮食作物之一,其作为粮食、饲料和燃料具有较高的产量潜力和营养价值。干旱是植物生产力的主要环境决定因素之一,干旱导致的玉米损失几乎等于所有其他自然灾害造成的损失之和,且玉米在灌浆期受到干旱将导致籽粒灌浆不充分,从而导致玉米减产。根据国家数据统计,中国目前约有60%的地区（包括河北省的玉米主产区,位于中国北部）属于旱地农业,每年有20%-30%的玉米产量损
蔬菜穴盘育苗可延长生育期,集约管理、培育壮苗,穴盘播种和摆放是机械化育苗的重要环节。目前我国育苗穴盘播种与穴盘摆放环节相互独立,穴盘播种地点固定、机械化程度高,但是播后育苗穴盘的整理、搬运与摆放作业仍以人工为主,劳动强度大、作业效率低,与播种环节极不匹配。人工搬运摆放穴盘易造成基质土和种子移位、跌落,影响育苗质量。鉴于此,本文设计了一款移动式穴盘育苗播种与摆放一体化装备,实现了播种与摆盘同步协调工
区块链仍处在发展的大好时期,但其发展过程中也暴露出了诸多问题,如被人利用在洗钱博彩等非法交易中。比特币作为最早和最具代表性的区块链系统,经受了最多的争议。这些争议多数并不是否定技术本身,而是源自对比特币网络缺乏足够的认识和监管手段。比特币去匿名化作为一项研究,正是去认识分析比特币网络的发展现状乃至演变过程,并且对于区块链上具体账户实体的去匿名化,该识别工作还能够协助监管和调查取证,因此具有很高的研
华北平原农田面临土壤有机质含量下降和土壤肥力降低等问题,提升农田土壤的质量迫在眉睫。生物炭是一种新兴的土壤添加剂,在改善土壤肥力与提高作物产量等方面亟待进一步探究。本研究以华北平原夏玉米-冬小麦轮作农田土壤为研究对象,采用田间试验的方法,研究不同生物炭施用水平下土壤有机碳组分（物理、化学、生物组分）、养分以及作物产量的变化,采用通径分析方法确定土壤有机碳组分影响养分的主要因素,进一步探求生物炭影响