自微乳化药物传递系统（SMEDDS）是由药物、油相、乳化剂和助乳化剂组成的均一、透明的溶液,在环境温度和温和搅拌的条件下,在水相中自发乳化形成粒径在10～100nm的微乳。其特点是粒径小、微乳液澄清透明、药物增溶量大、制剂稳定,药物存在于细小的油滴中,能快速分布于整个胃肠道,减少了由于药物与胃肠壁的直接接触而引起的刺激;药物在油/水两相之间分配,依靠细小油滴的巨大比表面积大大提高了水难溶性药物的溶出,提高了药物的生物利用度,同时可以避免水不稳定药物的水解及药物对胃肠道的不良刺激。SMEDDS处方由油相、乳化剂、助乳化剂与药物等组成。质量评价指标主要有乳剂粒径、自乳化效率、伪三元相图、相平衡、乳滴的极性、乳滴电荷、药物体外释放速率、体内药动学与生物利用度等。SMEDDS的制备主要通过微乳的伪三元相图完成。伪三元相图的制备方法有加水滴定法、加油滴定法、加乳化剂滴定法及交替加入法等。制备相图时,通常考察在乳化剂和助乳化剂的不同Km（Km为乳化剂和助乳化剂的质量比）下微乳的形成情况,以乳化剂和助乳化剂为伪三元相图的1个顶点,油相和水相为另外2个顶点,根据各组分在临界点时所占总量的百分比来确定该点在相图中的位置,将每个临界点连成曲线即得该组分在一定Km值下的伪三元相图,通过伪三元相图找出微乳化区域最大的组分。SMEDDS所选择的活性成分多为脂溶性或水难溶性的药物,能改善药物的口服吸收,增加其生物利用度。相比与传统提高生物利用度的方法,SMEDDS具有更加突出的优点:（1）对难溶性或脂溶性药物具有较高的增溶能力;（2）较高的物理化学稳定性;（3）能填充到硬胶囊或软胶囊,制备工艺简单,容易放大生产。因此,本课题选择SMEDDS运载银杏酮酯进行研究。银杏酮酯（GBE50）是从银杏叶中提取、精制而成的经国家食品药品监督管理局批准正式生产的二类中药新药和生产批文（国药准字Z20000049）的银杏原料药,其为棕黄色至黄棕色的粉术;有特殊香气,味苦。它主要含有黄酮醇苷、萜类内酯等化学成分,其中银杏总黄酮≥44%,黄酮醇苷≥24%、游离黄酮≥20%;萜类内酯≥6%;银杏酸≤5ppm。GBE50主要含有黄酮和内酯类两大成分,药理作用主要在血液系统方面、心血管方面、脑血管方面等有明显的保护作用。GBE50临床上主要用于治疗心脑血管疾病,如冠心病、心绞痛、心肌梗塞、脑栓塞、脑血管痉挛等。GBE50中的银杏萜类内酯难溶于水,黄酮中苷元类水溶性也差,影响内酯和黄酮类的溶解吸收,普通制剂口服吸收差,生物利用度低,且制剂苦感较重,影响制剂的临床使用和推广。为克服GBE50现有剂型的不足,提高生物利用度以提高临床效果,结合自微乳化给药系统,本论文研究GBE50-SMEDDS,由于SMEDDS的特点,增大了比表面积,药物释放快,可以增加GBE50的吸收速度和生物利用度,起到速效和高效的作用。为了系统研究GBE50-SMEDDS,本文通过测定GBE50在不同溶剂中的平衡溶解度与伪三元相图对组分进行了筛选,最终选定,乳化剂为聚氧乙烯蓖麻油Cremophor EL、助乳化剂为丙二醇1,2-Propanediol、油相为肉豆蔻酸异丙酯IPM,即Cremophor EL/丙二醇/IPM作为自微乳化的基本配方,制备了GBE50自微乳化制剂并对其性质（外观,粒径分布,自微乳化效率与微乳电镜下状态）进行了研究,最终GBE50-SMEDDS处方组成为GBE50 0.12g、丙二醇0.3g、Cremophor EL0.5g、IPM0.25g、Vit E0.03g。油相IPM含量为20.8%,乳化剂Cremophor EL的含量为41.7%,GBE50载药量为10%。GBE50-SMEDDS与水、0.1M HCl或6.8PBS接触后,轻微搅拌下很快在3min后均能白化形成均匀稳定的微乳,粒径为20～50nm。微乳在透射电镜观察为均匀球状液滴。选用了两种介质水与0.1M HCl,分别以GBE50-SMEDDS为固体制剂与微粒制剂进行了溶出度与释放度的测定。GBE50-SMEDDS的溶出与释放在两种介质中差异均不大。体外溶出测定中,GBE50-SMEDDS胶囊与GBE50粉末胶囊的溶出在前10分钟相差不大,但10分钟后,溶出差异渐大,45分钟后GBE50-SMEDDS胶囊的溶出可达80%以上,而GBE50粉末胶囊仅为40%;总体液平衡反向透析法中,GBE50-SMEDDS体外释放快,15分钟能达到约30%,45分钟能有70%,90分钟后趋于平衡,最后能达到90%。溶出度与释放度结果均表明,GBE50-SMEDDS的体外溶出度高,能有效提高GBE50的溶出与释放。GBE50-SMEDDS质量标准研究中,采用铝基硅胶薄层板法,以正已烷-乙酸乙酯（4:6）为展开剂,对GBE50中银杏内酯A与B进行了鉴别。采用反相高效液相色谱法对自微乳化组合物中总黄酮醇苷的含量进行了测定,以甲醇-0.5%磷酸（54:46）为流动相;流速为1ml/min;检测波长为368nm,以槲皮素、山柰素与异鼠李素为对照品,槲皮素回归方程为A=110973C-160122,r=0.999 5,线性范围0.163～1.141μg,平均回收率为99.25%,RSD为0.44%;山奈素回归方程为A=97764C-182398,r=0.999 5,线性范围0.2196～1.5372μg,平均回收率为99.20%,RSD为0.43%;异鼠李素回归方程为A=92938C-36124,r=0.999 8,线性范围0.0552～0.3864μg,平均回收率为99.31%,RSD为0.25%。结果表明,GBE50-SMEDDS含有银杏内酯A与B;总黄酮醇苷含量不低于2.4%。该方法简便快速,结果准确可靠,可作为该制剂的质量标准。以GBE50-SMEDDS外观性状、自微乳化效率（时间）、微乳粒径与总黄酮醇苷的含量为指标,考察了GBE50-SMEDDS的初步稳定性研究。低温试验中,GBE50-SMEDDS于4℃冰箱冷藏放置5天与10天后,其外观性状、自微乳化时间、形成微乳的粒径及药物含量,与0天结果比较,没有明显变化,表明GBE50-SMEDDS低温条件下稳定。高温试验中,GBE50-SMEDDS于60℃高温放置10天后,其外观性状虽无明显变化,但自微乳化时间、形成微乳的粒径及药物含量,与0天结果比较,有明显变化,表明GBE50-SMEDDS高温条件下不稳定。冷热循环试验（4℃与37℃）中,GBE50-SMEDDS放置5天与10天后仍为澄清、透明褐色溶液,并无药物晶体析出,同时自微乳化时间、微乳外观与粒径、药物含量无明显改变,表明GBE50-SMEDDS对温度变化的耐受力良好。强光照射试验（4500Lx±500Lx）中,GBE50-SMEDDS经强光照射10天后,颜色有变化,不澄清透明,药物含量明显降低,乳化时间延长,所得乳剂粒径相应增大,表明GBE50-SMEDDS对光照敏感,需避光保存。加速试验中,GBE50-SMEDDS在温度（40±2）℃、相对湿度（75±5）%条件下放置3个月后,其外观性状、自乳化时间、形成微乳的粒径及含量,与0月结果比较,没有明显变化,表明GBE50-SMEDDS加速条件下稳定性良好。留样试验中,GBE50-SMEDDS在室温留样条件下放置6个月,其各项考察指标基本无变化,表明GBE50-SMEDDS稳定性良好。研究GBE50-SMEDDS加介质自微乳化后微乳的稳定性,GBE50-SMEDDS经0.1M HCl稀释到200 ml后,8h内药物吸光值无明显变化,微乳剂外观与粒径并未发生明显改变,微乳在8h内稳定。初步稳定性研究结果表明,GBE50-SMEDDS在密封包装与常温贮存下,稳定性高,其外观性状、自微乳化时间、微乳粒径与药物含量均无明显变化。自微乳化制剂加介质后经自微乳化形成的微乳液在8h内稳定,从而保证GBE50在被胃肠道吸收之前以溶解状态的微乳形式存在而不析出,以确保其口服生物利用度。GBE50-SMEDDS大鼠体内药物代谢动力学研究中,以桑色素为内标,槲皮素、山奈素、异鼠李素为对照品,建立了银杏黄酮的血浆样品分析方法。血药浓度-时间曲线和药物动力学参数显示,GBE50-SMEDDS的Cmax比参比对照颗粒剂提高了0.3 mg/L,Tmax提前了2.7 h,消除速率减小,消除半衰期延长了7.4 h,分布速率增大,分布半衰期提前了2.2h,AUC_0-∞提高了13.8 mg.h/L,AUC_0-∞是参比对照颗粒剂的152.47%,提高了52.47%。GBE50-SMEDDS新制剂比现有市场剂型杏林颗粒剂生物利用度高,为临床疗效的提高提供了实验基础。GBE50-SMEDDS小鼠急性毒性实验结果表明,最大剂量组毒副反应明显,反应迟钝,眼睛呆滞,眼角有分泌物,腹部胀满,大便便溏,甚至死亡。毒副反应是由制剂中辅料油相、乳化剂与助乳化剂引起。半数致死量LD50=0.33ml（0.36g）/10g,LD50的95%的可信限0.30～0.37ml（0.33～0.41g）/10g。提示GBE50-SMEDDS小鼠急性口服给药有毒副作用,LD50是正常成人常用剂量（1.2g/60Kg）的1800倍,可见,GBE50-SMEDDS虽有毒副作用,但在临床上按说明使用,是安全的。GBE50-SMEDDS的动物药效实验结果表明,在GBE50-SMEDDS对急性血瘀模型大鼠血液流变学影响实验中,与正常对照组比较,血瘀模型组的全血黏度比（低切、中切、高切值）与血浆黏度比都有升高（P值分别为0.000,0.000,0.000,0.014）,表明造模成功。与血瘀模型组比较,给药阳性对照组能降低全血黏度比（低切、中切、高切值）,（P值分别为0.007,0.01,0.004）;给药GBE50-SMEDDS高剂量组能降低全血黏度比（低切、中切、高切值）与血浆黏度比（P值分别为0.000,0.000,0.001,0.001）;给药GBE50-SMEDDS中剂量组能降低全血黏度比（低切、中切、高切值）与血浆黏度比（P值分别为0.000,0.001,0.002,0.016）;低剂量组结果差异虽无显著性意义,但有降低趋势,表明GBE50-SMEDDS高、中、低剂量组有量效关系。各组的红细胞压积结果差异虽无显著性意义（原因可能与试验误差、检测方法及样本量较少等有关）,但均有作用趋势,并呈量效关系,说明GBE50-SMEDDS有改善急性血瘀模型大鼠血液流变学的作用,并呈剂量依赖性。在GBE50-SMEDDS对异丙肾上腺素（ISO）致大鼠心肌缺血的保护作用实验中,与正常对照组比较,缺血模型组大鼠注射ISO后很快出现心肌缺血改变,表现为心电图ST段抬高（ST段30与35 min的P均为0.001）,表明造模成功。与缺血模型组比较,给药阳性对照组可对抗ISO所致的心肌缺血的心电图改变,表现为ST段有下降（ST段30与35 min的P分别为0.038,0.007）;给药GBE50-SMEDDS高剂量组可对抗ISO所致的心肌缺血的心电图改变,表现为ST段有下降（ST段30与35 min的P分别为0.005,0.001）;给药GBE50-SMEDDS中剂量组可对抗ISO所致的心肌缺血的心电图改变,表现为ST段有下降（ST段30与35 min的P分别为0.023,0.007）;低剂量组结果差异虽无显著性意义,但有降低趋势,表明GBE50-SMEDDS高、中、低剂量组有量效关系。各组的T波结果差异虽无显著性意义（原因可能与试验误差、检测方法及样本量较少等有关）,但均有作用趋势,并呈量效关系。说明GBE50-SMEDDS有改善大鼠心肌缺血损伤引起心电图变化的作用,并呈剂量依赖性。对大鼠心肌缺血损伤引起心肌三酶异常的影响中,与正常对照组比较,缺血模型组的CK、LDH与AST释放均增多（P均为0.000）,表明造模成功。与缺血模型组比较,给药阳性对照组能降低CK、LDH与AST释放（P分别为0.000,0.000,0.002）;给药GBE50-SMEDDS高剂量组能降低CK、LDH与AST释放（P均为0.000）;给药GBE50-SMEDDS中剂量组均能降低CK、LDH与AST释放（P均为0.000）;给药GBE50-SMEDDS低剂量组均能降低CK、LDH释放（P分别为0.005,0.001）;GBE50-SMEDDS高、中、低剂量组有量效关系,说明GBE50-SMEDDS有改善大鼠心肌缺血损伤引起心肌三酶异常的作用,并呈剂量依赖性。在动物药效实验中,GBE50-SMEDDS能改善急性血瘀模型大鼠的血液流变异常,对异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血有保护作用,并呈剂量依赖性。等效剂量的GBE50-SMEDDS比对照组现有市场剂型杏林颗粒剂作用趋势好,说明GBE50-SMEDDS能有效提高GBE50的药效作用,为临床疗效的提高提供了动物药理实验基础。本文结合SMEDDS的特点与GBE50作用效果及现有剂型的不足,从处方筛选、微乳制备、工艺优化、体外评价、质量标准、初步稳定性、体内药动学与药效试验等方面对GBE50-SMEDDS进行了研究,研究结果表明,GBE50-SMEDDS处方组成稳定、质量可控、体外释放快、生物利用度有提高、药效作用增强,值得进一步深入研究。