丹参对脊髓缺血再灌注损伤HSP70、Bcl-2、Bax表达的作用及机制

来源 :福建中医药大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:liqwart2
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目的:观察丹参及有效单体丹参酮对大鼠脊髓缺血再灌注损伤神经细胞凋亡蛋白HSP70、Bcl-2、Bax表达的影响,探讨丹参对大鼠脊髓缺血再灌注损作用的机制。方法:采用体重250±10g的清洁级SD大鼠120只,按照随机数字法分为假手术组、脊髓缺血再灌注组、丹参组和丹参酮组,每组各30只。假手术组手术分离腹主动脉至右肾动脉起始部后不阻断腹主动脉即终止手术;脊髓缺血再灌注组按张俐改进的脊髓缺血再灌注损伤模型造模,不给予药物;丹参组于术前半小时腹腔注射丹参注射液;丹参酮组于术前半小时腹腔注射丹参酮Ⅱa磺酸钠注射液。四组分别于术后再灌注0.5h、1h、4h、8h、12h共五个时间点取材,每个时间点6只大鼠。采用ELISA法检测脊髓组织HSP70、Bcl-2、Bax的含量,并用免疫组织化学染色法检测脊髓组织Bcl-2、Bax阳性表达细胞量,尼氏染色光镜下观察比较脊髓组织病理学的改变。结果:1.假手术组各个时点HSP70呈轻度表达,脊髓缺血再灌注组0.5h即有HSP70表达上升,随着时间的推移表达量逐渐增加,并于12h内持续增高,于同一时点脊髓缺血再灌注组HSP70表达量均高于假手术组,具有非常显著性差异(P<0.01);丹参组与丹参酮组HSP70表达量各时点均高于脊髓缺血再灌注组,具有非常显著性差异(P<0.01)。2.假手术组各个时点Bcl-2呈低水平表达,脊髓缺血再灌注组1h即有Bcl-2表达增加,接着表达量逐渐上升,于同一时点脊髓缺血再灌注组Bcl-2阳性表达均高于假手术组,具有非常显著性差异(P<0.01);丹参组、丹参酮组与脊髓缺血再灌注组同一时点比较,Bcl-2阳性表达较高,具有非常显著性差异(P<0.01)。3.假手术组各个时点Bax呈极少量表达,脊髓缺血再灌注组0.5h即有Bax表达增强,随时间延后表达量逐渐上升,并于12h内持续增高,各时间点脊髓缺血再灌注组Bax阳性表达均高于假手术组,具有非常显著性差异(P<0.01);丹参组和丹参酮组Bax阳性表达各时间点均低于脊髓缺血再灌注组,具有非常显著性差异(P<0.01)。4.脊髓缺血再灌注损伤后0.5h、1h即可见部分神经元体积缩小或轻度肿胀变形,尼氏小体轻度减少。随着时间的延后病理学改变进一步加重。在各个时点,丹参与丹参酮损伤脊髓的细胞形态及尼氏小体数量明显改善。结论:1.本实验采用的大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型稳定,操作简单,重复性好,可满足该实验的要求,值得应用推广。2.在脊髓缺血再灌注损伤中,丹参及其有效单体丹参酮通过促进HSP70表达,进而促使Bc1-2蛋白表达上调、抑制Bax蛋白表达,从而减轻神经细胞凋亡,对脊髓缺血再灌注损伤起到保护作用。3.通过形态学证实丹参及其有效单体丹参酮确实能有效对脊髓缺血再灌注损伤后的脊髓神经细胞。
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