Weisiensin B影响拟南芥生长素极性运输分子机制的初步研究

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多年生草本、灌木或亚灌木香茶菜属植物在生长过程中能够产生含量丰富、种类繁多的次生代谢产物,影响自身或周围植物的生长,对生态环境具有重要贡献。对映-贝壳杉烷型二萜就是该属植物次生代谢产物中最重要的一种,目前已分离得400余种。基于生长素极性运输在植物体内形成以器官顶端为中心的生长素浓度梯度,参与调控植物株型建成、顶端优势、叶序和花序发育、侧根和不定根形成、微管束发育、果实成熟、胚胎发育以及向性生长。研究对映-贝壳杉烷型二萜化感潜能,探索其是否影响生长素极性运输,有望为研究植物次生代谢产物对生长素极性运输的影响提供借鉴,为研究其机制提供理论基础。本研究以对映-贝壳杉烷型二萜化合物weisiensin B为受试化合物,模式生物拟南芥为植物材料,先研究了weisiensin B对野生型拟南芥根系生长的影响,以评估其是否具有化感潜能;接着,观察weisiensin B对生长素积累的影响,并在生长素运输载体蛋白缺陷型突变体、转录和翻译水平检测其是否影响生长素运输载体的表达。研究结果如下:(1)10μM、20μM、40μM weisiensin B抑制野生型拟南芥主根伸长和主根细胞长度;(2)10μM、20μM、40μM weisiensin B处理后野生型拟南芥侧根原基与侧根数目之和减少,但侧根原基(A期+B期)数目没有显著性变化,而侧根(C期+D期)数目明显减少,说明weisiensin B阻滞侧根发育;(3)20μM、40μM weisiensin B均极显著抑制野生型拟南芥根毛长度和数量,10μM weisiensin B仅抑制根毛长度;(4)10μM、20μM、40μM weisiensin B使DR5::GUS在根部小柱细胞、静止中心、中柱中的积累增加;(5)10μM、20μM、40μM weisiensin B在转录、翻译水平促进PIN1、PIN2的转录和表达,抑制PIN3.PIN7及AUX1的转录和表达;对PIN4的调控与作用时间有关,而且对转录和翻译的调控效果并不一致;(6)PIN2基因的突变、PIN2、PIN3、PIN4三个基因的同时突变、PIN3、PIN4、PIN7三个基因的同时突变削弱了10~20μM weisiensin B、0.3μM NPA对拟南芥主根延伸的抑制作用,但上述生长素输出载体的突变均未削弱weisiensin B、NPA对侧根发育的抑制;(7)PIN4基因的突变不能削弱weisiensin B对主根和侧根生长发育的抑制;(8)AUX1基因的突变不仅能够削弱10~20μM weisiensin B对拟南芥主根延伸的抑制作用,还能够削弱10~40μM weisiensin B对侧根发育的抑制作用。对映-贝壳杉烷型二萜化合物weisiensin B抑制拟南芥根系发育,具有一定的化感潜能,且其作用效果涉及对生长素积累的影响,进一步研究表明其影响生长素极性运输载体在根部的表达和定位。
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