卵母细胞减数分裂过程经历了G2/M转换期和MII期两次停滞,在正常生理条件下它们分别被激素和精子入卵刺激而恢复细胞周期进程.卵母细胞发生生发泡破裂、染色质凝集、纺锤体组装、极体排放,染色体去凝集,核膜重建等一系列的胞质和核物质的变化.这一过程与微管的组装有密不可分的关联.本实验主要采用体外培养、药物处理、激光共聚焦显微术、免疫蛋白印迹以及抗体显微注射等方法研究了Polo-like激酶1(Plk1)、γ-微管蛋白、Aurora-A在猪和小鼠卵母细胞减数分裂及胚胎早期发育过程中的表达、分布和作用.Plk1在卵母细胞成熟过程中表达量维持恒定.在GV期卵母细胞中,Plk1均匀分布,当卵母细胞进入MI期时,Plk1位于纺锤体两极,然后又逐渐向纺锤体中部转移;当卵母细胞处于分裂后期或末期时,Plk1位于中体位置.受精后Plk1先是在胞质中均匀分布,当雌雄原核形成时Plk1集中分布在雌雄原核周围.当用秋水仙素和紫杉醇分别处理MI和MII期纺锤体时,发现纺锤体微管的正常组装受到破坏.这些研究表明:在猪卵母细胞成熟、受精以及早期胚胎发育过程中,Plk1是调节微管组装的重要因子.γ-微管蛋白是纺锤体的组装成分,γ-微管蛋白在猪卵母细胞成熟过程中表达量不变.利用免疫蛋白印迹检测Aurora-A在小鼠卵母细胞成熟过程中表达量的变化,GV和MII期的表达量高于其他时期.从MI期到MII,Aurora-A定位在纺锤体的两极,同样定位于早期的胚胎纺锤体的两极.Aurora-A在猪卵母细胞成熟过程中表达量不变.GV期,Aurora-A均匀分布于生发泡中.GVBD后,Aurora-A聚集在减数分裂的纺锤体上.受精后,它聚集在原核和胚胎的细胞核中.当用秋水仙素或straurosporine阻止微管组装时,Aurora-A仍然定位在纺锤体区,当用紫杉醇处理后,Aurora-A在胞质中呈多点状分布.因而,Aurora-A在猪卵母细胞成熟和受精中具有多重调节功能.