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目的:通过免疫组化方法对乳腺增生病、乳腺不典型增生及乳腺癌进行多指标联合检测,并结合显微镜下组织学形念特点进行观察,以利于乳腺癌早期发现及早期诊断。
材料和方法:收集齐齐哈尔市第一医院病理科1999-2004年收检的84例乳腺癌单切标本,另选75例乳腺不典型增生及乳腺单纯性增生石蜡包埋标本为本研究对象。均为女性,年龄22-70岁。其中乳腺增生病5例,乳腺轻度不典型增生13例,乳腺中度不典型增生36例,乳腺重度不典型增生21例,乳腺原应癌33例,乳腺浸润癌51例。并对每例蜡块连续切片,厚4um,HE染色,另外作CK/34βE12、actin、P63、S-100、C-erbB-2、PCNA、CyclinD1免疫组化染色及对照,应用图象分析仪器对上述实验结果进行定量分析,图象分析仪所得数据均经统计学处理,进行单项指标的显著性检验和多项指标的相关性检验。
结果:S-100蛋白结果显示:各组S-100表达阳性率分别为乳腺增生病60﹪(3/5),轻度非典增生46.1﹪(6/13),中度非典型增生33.3﹪(12/36),重度非典型增生9.5﹪(2/21),原位癌3.0﹪(1/33),浸润癌未见阳性MEC。重度非典型增生组与原位癌组比较差异不显著P>0.05。
CK/34βE12表达结果显示:乳腺增生病与轻度非典型增生组中所有病例均可见MEC阳性且连续完整分布;中度非典型增生阳性率72.2﹪(26/36),20例多数呈连续完整分布6例呈断续性分布;重度非典型增生阳性率为66.7﹪(14/21),9例为连续完整分布,5例呈断续分布;原位癌阳性率为21.2﹪(7/33),其中5例呈断续分布,2例呈零星散在分布;浸润癌MEC均为阴性。乳腺重度非典型增生与原位癌及浸润性癌相比差异有显著性,P<0.01。
actin表达结果显示:各组actin表达阳性率分别为:乳腺增生病100﹪(5/5),轻度非典型增生100﹪(13/13),中度非典型增生100﹪(36/36),重度非典型增生71.4﹪(15/21),原位癌24.2﹪(8/33),浸润癌为0﹪(0/51)。重度非典型增生病与原位癌及浸润癌相比差异有显著性p<0.01。阳性细胞MEC分布方式,在乳腺增生病及轻、中度非典型增生组的肌上皮细胞皆以连续性分布为主;重度不典型增生组肌上皮细胞大部分连续性分布,少部分为断续性分布;原位癌周围少许肌上皮多为不连续分布或零星散在分布,浸润性癌周围无肌上皮。
P63表达结果显示:在乳腺增生病及轻、中度非典型增生组病例中所有MEC胞核均显示阳性表达;21例重度非典型增生中12例呈断续性分布,4例呈连续性分布,阳性率为76.2﹪(16/21);33例原位癌中仅8例呈明显不连续或零星散在分布,阳性率为24.2﹪(8/33);51例浸润性癌中肌上皮明显缺失。重度非典型增生与原位癌及浸润癌相比差异有显著性p<0.01..
C-erbB-2蛋白结果表明:在乳腺增生病上皮呈阴性表达,随着上皮增生和异形程度加重,C-erbB-2癌基因产物表达阳性率均呈逐渐递增,至原位癌达高峰,阳性率为66.7﹪(22/33),而浸润性癌则出现下降,阳性率为54.9﹪(23/51)。
PCNA蛋白结果显示:在乳腺增生病中不表达,在乳腺癌中其表达有增强趋势,随着病变程度在轻度非典型增生--中度非典型增生--重度非典型增生--原位癌--浸润癌阳性表达率逐渐增高,其中度非典型增生与重度非典型增生相比差异显著P<0.01。CyclinD1蛋白结果显示:在乳腺增生病及轻度非典型增生病均呈阴性表达,在中度非典型增生有少量呈阳性表达,阳性率为22.2﹪,强阳性表达主要见于重度非典型增生(76.2﹪)、原位癌(75.7﹪)、及浸润癌(76.5﹪),其中中度非典型增生与重度非典型增生相比有显著差异P<0.01。
结论:本课题对乳腺增生病,乳腺癌前病变及乳腺癌进行CK/34βE12、P63、actin、S-100、PCNA、C-erbB-2、CyclinD1多项指标检测结果表明:CyclinD1、PCNA、C-erbB-2三项指标中,有1-2项指标呈高水平表达应作为可做早期癌的监测重点。P63、actin、CK/34βE12对于确定肌上皮的存在较有意义,而肌上皮的存在还是缺失是判断乳腺良恶性病变的重要指标,因此CK/34βE12、actin、P63、CyclinD1、PCNA、C-erbB-2对判断乳腺良恶性病变有着极为重要的意义。在肌上皮抗体中敏感性较高的是actin、CK/34βE12,特异性较高的是P63,若成对的选择,如P63加actin或p63加CK/34βE12,效果更好。其中S-100对肌上皮表达不稳定,因此是显示乳腺MEC最不可靠的指标。因此本研究记录表明,对乳腺疾病特别是乳腺不典型增生及乳头状瘤病进行CK/34βE12、Actin、P63、PCNA、C-erbB-2、CyclinD1等多项指标检测有利于早期发现乳腺癌并将为乳腺癌的病理学早期诊断提供新的重要依据。