IgA在食管上皮内瘤变组织及癌中的表达

来源 :汕头大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:csliu08
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背景和目的经典免疫学观点认为免疫球蛋白A(IgA)仅由浆细胞产生和分泌,而最近研究发现乳腺癌、结肠癌、胃癌等多种类型的肿瘤细胞系不但能够表达IgA mRNA、蛋白,而且肿瘤源性IgA在体外可能促进肿瘤细胞的增殖;而食管癌细胞能否表达IgA mRNA和蛋白还不清楚。食管癌是世界上最常见的6大恶性肿瘤之一,其中50%以上的新发病例发生在我国,已严重危害我国人民的生命和健康。目前对IgA在食管癌组织中表达情况的研究局限在癌间质的浆细胞,而食管癌实质和EIN中是否表达IgA蛋白尚未见报道。本研究用免疫荧光、免疫组化(IHC)和巢式RT-PCR检测食管癌细胞系EC109以及食管正常上皮组织是否存在IgA蛋白和mRNA的表达,用IHC法观察IgA在潮汕食管癌高发区食管正常组织、慢性炎症、食管上皮内瘤变(EIN)及食管癌组织中的表达情况并比较其表达差异,并初步探索IgA表达与食管炎症、食管癌增殖的关系。材料与方法材料共收集标本148例,其中匹配的食管癌和正常对照组织81例、上皮内瘤变标本35例( 2008年至今取自汕头大学医学院病理科),胃镜活检正常食管标本14例及炎症标本18例( 2009年至今取自揭阳市人民医院)。食管癌组织学类型均为鳞癌,根据细胞分化程度分级:高分化鳞癌23例(Ⅰ级),中分化鳞癌46例(Ⅱ级),低分化鳞癌12例(Ⅲ级);上皮内瘤变标本中Ⅰ级15例,Ⅱ级5例,Ⅲ级15例,将Ⅰ级和Ⅱ级合并称轻度上皮内瘤变,Ⅲ级称重度上皮内瘤变;活检炎症标本中轻度炎症10例,中度炎症6例,重度炎症2例。方法:1.免疫荧光细胞染色(Immun oflu ores cenc e cell stain ing):检测IgA蛋白在EC10 9细胞中的表达。2.巢式RT-PC R(Nest ed RT-PC R):检测IgAmRN A在食管癌细胞系EC109细胞中的表达。3. HE染色(Hemato xyli n and eosin staini ng,H E):切片常规HE染色,观察食管癌的组织学类型,分化程度,炎症反应程度等。4.免疫组织化学染色(Immun ohis toch emis try, IHC):采用Envis ion两步法检测食管正常粘膜、炎症组织、上皮内瘤变组织、癌组织中IgA蛋白及癌组织中Ki-67的表达。5.图像分析及免疫组化结果判定(Image analys is and resul ts asses sing of IHC):应用Leica IM50图像采集系统和Image -Pro Plus 6.0图像分析系统对染色结果分析。6.统计分析(Stat isti cal Analys is):应用SPSS13 .0对统计结果进行分析,采用非参数检验、单因素方差分析和Spear man等级相关分析。结果1.食管正常上皮组织及炎症组织均有IgA蛋白表达,随着炎症程度的增加,食管上皮IgA的表达有增多的趋势,两者有正相关的趋势,但差异无明显统计学意义(P>0.05)。2.食管上皮内瘤变组织存在IgA蛋白的表达,随着细胞异型性的增加,IgA的表达有增加的趋势,两者有正相关的趋势,但差异无明显统计学意义(P>0.05)。3.食管癌细胞系存在IgA蛋白和mRNA的表达;食管正常上皮组织也存在IgA mRNA的表达。4.食管癌组织存在IgA蛋白表达,多表达于细胞浆;IgA在癌组织中的表达明显低于重度上皮内瘤变及正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);按IgA的表达程度对食管癌组织分组,各组Ki-67标记的食管癌平均增殖指数(LI)分别为:(-):0.426±0.120,(+):0.435±0.131,(++):0.546±0.148;随着IgA表达的增加,LI明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),并且两者呈正相关(rs=0.22 3,P<0.05)。结论1.食管正常上皮组织存在IgA mRNA和蛋白的表达。2.食管上皮组织IgA的表达与炎症程度及上皮内瘤变均有一定的正相关趋势。3.首次发现食管癌细胞系也存在IgA蛋白和mRNA的表达;食管癌实质也有IgA蛋白的表达,并与增殖有一定关系,癌组织中IgA蛋白较正常组织低表达是否与IgA是结构异常有关有待研究。
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