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背景随着科学技术的进步以及放射医学的进展,人们接触到电离辐射的机会也越来越多。在给人们的生活带来便利的同时,电离辐射也对人体造成了不利的影响。生殖系统对电离辐射极为敏感,尤以睾丸为甚;极低的辐射剂量即可破坏睾丸的功能与结构,造成精子数目的减少和雄激素合成减少。中药对睾丸辐射损伤有一定的防护作用,但是其研究仍然较少,多集中于中药单体、少数几个复方的研究,无法满足临床需求。目的在理论上根据电离辐射的病因学特点以及主要的临床表现,结合中医基础理论,总结电离辐射致男性生殖损伤的中医病机,为睾丸辐射损伤的辨证论治提供理论参考;同时因电离辐射损伤男性生殖系统的临床表现,结合其病因病机特点,总结其用药规律,为临床和科研用药提供思路。在实验研究中观察电离辐射对睾丸急性辐射损伤的效应以及中药复方的防护作用,并探讨其是否通过影响TLR5/NF-K B信号途径发挥了作用。方法理论研究:结合电离辐射的中医病因学特点以及具体治病特点,探讨电离辐射所致生殖系统损伤的中医病机;梳理少弱精子症用药规律,结合电离辐射致男性生殖损伤的病因病机特点,为电离辐射致睾丸辐射损伤的用药提供参考。实验研究:雄性Balb/c小鼠按体重随机分为正常组、模型组、阳性药组、高剂量组、低剂量组,正常组小鼠空白对照,其余四组小鼠给予一次性2.0 Gy 60COγ射线全身照射。照射前、后随时观察小鼠的皮毛、精神状态、粪便性状、饮食、活动等整体状况,记录小鼠体重和睾丸指数,绘制小鼠体重变化曲线。分别于给药10天后以及照后1、3、7天处死,进行以下实验。实验一:检测不同时间的各组小鼠体重、睾丸指数的变化,观察不同时间点各组小鼠睾丸结构的病理改变并进行半定量分析。实验二:检测不同时间的各组小鼠睾丸生精细胞凋亡率与线粒体凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA、Cytochromec 以及Caspases3的表达变化。实验三:检测不同时间的各组小鼠睾丸TLR5/NF-κ B信号通路相关因子mRNA表达和TLR5和NF-κ B免疫组化表达变化。结果理论部分:电离辐射致男性生殖损伤时,肾精亏耗,生精乏源;脾失健运,气血乏源;同时电离辐射毒邪炽盛,耗气伤阴,既损耗了生殖之精,并使其后天乏养,致精少不育;也使肾失于“作强”,宗筋失于濡润,而致阴茎萎而不用,坚而不久,性功能发生障碍。少弱精子症治疗上药物选择以补益药为主,固精缩尿止带药,利水渗湿药,清热药和活血化瘀药为辅;从用药频次来看,高频中药主要为补益药,包括补阳药、补阴药、补气药、补血药,多入肾经,性味以甘,温平为主。药物配伍上注重阴阳相配、气血同调、补泻兼施等多种方式,对应其复杂多变的病机特点。实验部分:实验一:小鼠体重在照射后第2天体重降至最后即开始缓慢回升,小鼠睾丸形态结构损伤且模型组的睾丸Johnsen评分随着照射天数的变化而逐渐降低。与模型组比较,中药复方在照后可以有效的促进小鼠体重恢复,防护睾丸病理形态改变。实验二:小鼠睾丸生精细胞凋亡率在照后明显升高,凋亡相关基因:Cytochrome CmRNA、Caspases3mRNA和Bax mRNA的表达升高,Bcl-2mRNA的表达降低。与模型组比较,中药复方在照后可以有效的降低生精细胞凋亡率,使Cytochrome C mRNA、Caspases3mRNA和Bax mRNA的表达降低,Bcl-2 mRNA的表达升高。实验三:从免疫组化的结果来看:在照前各给药组TLR5和NFκB的表达与正常组比较无显著性差异;在照后1天,与正常组和模型组相比,各给药组TLR5的表达升高;高剂量组NFκB的表达升高。在照后3天,与正常组和模型组相比,阳性药组和低剂量组TLR5的表达升高;低剂量组和高剂量组NFκB的表达升高。在照后七天,与正常组相比,各照射组TLR5的表达降低;与模型组相比,高剂量组和低剂量组的TLR5和NF κ B的表达均升高。结论:理论研究:电离辐射所导致的男性生殖损伤的中医病机可能有以下三个方面:1.毒邪炽盛,肾精亏虚;2.脾失健运,气血乏源;3.毒邪炽盛,耗气伤阴。在具体用药方面可以借鉴少弱精子症的用药规律,并结合电离辐射导致生殖系统的病因病机,有利于在临床上更好的治疗电离辐射所导致的生殖功能的损害。实验部分:本实验复制小鼠睾丸急性损伤模型成功,中药复方尤其是低剂量起到了良好的防护作用,这可能是通过激活TLR5/NF κ B通路降低生精细胞凋亡而实现的。