背景:玉米赤霉烯酮(ZEN)是类雌激素真菌毒素,多种镰刀菌属霉菌均可产生。可引起多种毒性作用,尤其是生殖毒性,对植物、动物乃至人类都造成极大危害。ZEN作为霉菌毒素中污染极其严重的毒素之一,在自然界和生活环境的各种物质中,尤其是谷类及其副产品中的检出率一直居高不下,给养殖行业造成了巨大的经济损失。在对ZEN的脱毒过程中,传统的物理法和化学法脱毒结果并不理想,因为这两种方法效率不高且经常有一些副作用,生物脱毒因其安全性和高效性,逐渐成为了脱毒的新选择。贝莱斯芽孢杆菌作为一种新型生防因子,对其研究已经涉及了多种领域,随着研究的不断深入,其将在疾病防控、农药开发、动物食品添加剂应用等多方面有广阔的应用前景。目的:深入研究一株对ZEN有高效降解作用的贝莱斯芽孢杆菌A2的降解作用机理,为ZEN的生物脱毒提供理论依据,为贝莱斯芽孢杆菌A2生物脱毒的临床应用奠定基础。方法:以ZEN作为唯一碳源,通过HPLC检测贝莱斯芽孢杆菌A2各组分与ZEN共培养72h后毒素的残余量,定位脱毒活性物质;使用不同浓度的硫酸铵提取最佳反应组分的蛋白,粗提后与ZEN共同孵育24 h,通过HPLC检测毒素的残余量,确定最佳硫酸铵浓度;通过不同的反应时间、p H、温度,对降解酶粗提物进行降解条件优化研究,确定降解酶的最佳反应条件;将提取出的蛋白进行变性、凝胶电泳、考马斯亮蓝染色并轻微脱色后,将胶条目的条带进行蛋白质谱检测。结果:HPLC检测贝莱斯芽孢杆菌A2发酵液、菌体、胞内液、细胞成分及灭活菌成分与ZEN共培养72 h后毒素的残余量表明,能大量降解ZEN的活性物质存在于菌株发酵液中,降解率超过80%;不同浓度的硫酸铵提取发酵液蛋白与ZEN共同孵育后发现,80%浓度下的硫酸铵能析出更多的具有降解活性物质;通过对降解酶粗提物进行降解条件优化研究发现,降解酶的最佳降解条件为p H 8、37℃条件下反应36 h;将胶条目的条带进行蛋白质谱检测后,根据GO的分析方法,推断NADPH脱氢酶和酚酸脱羧酶酶为贝莱斯芽孢杆菌A2菌株产生的ZEN降解酶。结论:贝莱斯芽孢杆菌A2发酵上清液中粗提出的降解酶能有效降解ZEN,且最佳降解条件为p H 8、37℃、36 h;根据质谱检测结果,推测ZEN降解酶为NADPH脱氢酶和酚酸脱羧酶。