螺旋藻γ-亚麻酸的提取及其体外生物活性研究

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γ-亚麻酸(GLA)是一种人体必需的多不饱和脂肪酸,参与前列腺素的合成和代谢过程,具有降血脂、抗血栓、抗肿瘤等生理作用,在螺旋藻(Spirulina platensis, SP)中的含量极为丰富。本研究旨在研究一种从螺旋藻中提取GLA的方法及GLA的体外抗氧化、抗血栓及抑癌活性,为其在功能保健食品中应用奠定基础。本研究采用超临界二氧化碳萃取及溶剂提取两种方法对螺旋藻中GLA进行提取并对提取条件进行正交优化,并对硝酸银硅胶柱层析法纯化后的提取产物分别进行体外抗氧化活性、抗血栓以及抑癌活性的研究。首先采用1,1-苯基-2-苦肼基(DPPH)自由基清除法、羟基自由基清除法(HRIA)以及硫代巴比妥酸法来评估GLA体外抗氧化活性。抑癌及抗血栓活性分别通过测定GLA处理后人肝癌HepG2细胞中过氧自由基(ROS)和丙二醛(MDA)浓度以及凋亡细胞比率的变化,以及腺苷二磷酸导致的血小板凝集抑制率变化来进行研究。结果表明,溶剂提取较超临界二氧化碳提取效果更好,且以乙醇为溶剂、料溶比1∶12(w/v,螺旋藻粉质量g溶剂体积mL)、提取温度70℃,提取时间90min时能够得到最高的GLA产量8.3g kg-1±0.17g kg-1(GLA/干量)。GLA提取物显示出了较强的脂质抗氧化能力(IC50=0.01μg·L-1),优于清除DPPH自由基及羟基自由基能力,表明脂质环境能够促进其抗氧化效果。主要因为其亲脂性并通过自身氧化来保护膜免受损伤。此外,螺旋藻GLA能够呈浓度及时间依赖性抑制HepG2细胞增殖,250μM螺旋藻GLA能够诱导ROS产生及脂质过氧化及凋亡的发生,显示了显著的抑癌活性。GLA提取物能够抑制血小板聚集,并呈浓度依赖性,GLA浓度由0.36mM升高至36mM,其血小板聚集抑制率由42.3%提高至82.6%,表现出良好抗血栓活性。本研究表明,乙醇为溶剂从螺旋藻中提取GLA得到了更高产量,且提取物展现出良好的体外抗脂质过氧化、抑制人肝癌细胞HepG2增殖以及抑制血小板聚集的生物活性。因此,螺旋藻来源GLA在健康营养及功能食品领域具有巨大应用前景。
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