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目的通过文献分析,获得可能导致新生儿溶血病(heamolytic disease of the newborn HDN)发病的相关危险因素;结合临床实际,针对HDN实验室诊断检测中最常见的且尚有争议的问题——IgM抗体存在可影响IgG抗体效价准确检测,研究适合临床HDN实验室诊断的IgG抗体效价准确检测的实验条件。方法1.采用新生儿溶血病相关检索词检索中文及英文医学数据库。通过阅读文献题目和摘要筛选出关于新生儿溶血病发病危险因素的文献,筛查可能与HDN发病相关的危险因素。2.用人源血浆及单克隆IgG和单克隆IgM抗D标准试剂血清配置4组不同效价配比的模拟血浆,效价分布分别为：128+512、128+128、128+32和128+8(IgG+IgM)。用等体积2-Me与模拟血浆混合,在室温和37℃两种条件孵育30min破坏IgM抗体,分别用盐水血凝法和微柱凝胶抗人球蛋白法检测模拟血浆破坏前后IgM和IgG抗体效价。3.用等体积2-Me分别在室温和37℃孵育30min破坏孕妇血浆内IgM抗体,并分别用盐水血凝法和微柱凝胶抗人球蛋白法检测血清破坏前后IgM和IgG抗体效价。4.应用免疫蛋白电泳对待检血清进行IgM和IgG免疫球蛋白定性检测,通过免疫蛋白定量检测2-Me破坏IgM抗体前后IgG和IgM的变化水平,评估2-Me对IgM抗体的处理效果及对IgG抗体效价的影响。结果1.母亲年龄、母婴血型不合、不规则抗体、IgG抗体效价、怀孕次数、流产史、死胎史、输血史等均有报道与新生儿溶血病发病相关。2.模拟血浆的4组标本用2-Me在室温和37℃两种不同条件破坏IgM抗体的效果无统计学差异(p>0.05);当IgM≤gG抗体效价时,IgG抗体效价不受IgM干扰,检测结果与已知结果一致;当IgM>IgG抗体效价时,IgM可掩盖IgG抗体效价结果,导致IgG效价检测结果偏高。破坏前检测IgG效价为128,IgM效价不同的3组标本IgG抗体效价分数与IgM效价成正相关,破坏后4组IgG抗体效价分数差异无统计学意义。3.人源血清标本破坏后IgM抗体效价显著降低(P<0.05)；IgM抗体破坏前、室温破坏后、37℃破坏后IgG抗体效价检测结果无统计学差异(p>0.05)：室温和370C两种条件破坏IgM抗体后,IgG抗体效价分数无显著性差异(p>0.05),均较破坏前降低(p<0.05)。4.定量分析结果表明,2-Me破坏前后模拟血浆和患者标本IgM抗体定量结果均有增高(p<0.05)；破坏前后应用免疫电泳定性检测IgG和IgM条带均会出现。结论1.母亲年龄、母婴血型不合、不规则抗体、抗体效价、怀孕次数、流产史、死胎史、输血史等可能为HDN发病危险因素。2.当患者血清IgM≤IgG效价时,IgM不会影响IgG抗体效价检测准确性。患者血清内IgM抗体经2-Me室温破坏30min后可达到应用微柱凝胶法检测IgG抗体效价的实验要求。