酰胺类农药与生物大分子相互作用机制的研究

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采用多光谱测试法及分子对接技术分别研究酰胺类农药(啶酰菌胺、环酰菌胺和磺酰磺隆)与BSA和DNA的相互作用机制,为农药的合理、安全使用及农药的微观致毒性评价提供理论及实验基础。首先运用荧光光谱测试技术研究三个酰胺类农药与BSA的猝灭机制,发现啶酰菌胺、环酰菌胺和磺酰磺隆对BSA的猝灭机制均为静态猝灭。位点特异性实验阐明啶酰菌胺和环酰菌胺主要结合在BSA的SiteⅡ位,而磺酰磺隆主要结合在BSA的Site I位。热力学参数推导三个酰胺类农药与BSA的主要作用力是氢键和/或范德华力。蔗糖竞争性猝灭Trp实验进一步证明了三个酰胺类农药和BSA结合过程中存在氢键作用。此外,同步和三维荧光光谱测试技术表明啶酰菌胺和环酰菌胺会降低Trp或Tyr周围的微环境极性;而磺酰磺隆则会增加Trp或Tyr周围的微环境极性。红外光谱测试结果表明,三个酰胺类农药会降低BSA的α-螺旋含量,也会对其他二级结构产生一定的影响。随后,结合多光谱测试技术及粘度法研究了酰胺类农药与DNA的结合模式,结果显示啶酰菌胺、环酰菌胺和磺酰磺隆主要通过沟区结合于DNA上。圆二色光谱显示,三个农药会对DNA的结构产生微弱的影响。此外,啶酰菌胺、环酰菌胺和磺酰磺隆与DNA的结合常数分别为:2.45×103,2.39×103,2.58×103 M-1,且两者以1:1相互作用。热力学参数推导农药与DNA的主要作用力为氢键和范德华力。最后由分子对接模拟技术进一步验证上述实验结果。
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