【摘 要】
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谷胱甘肽(GSH)在医药、化学和生物等领域有着广泛的应用。谷胱甘肽易氧化、不易透过细胞膜、生物利用率低等问题在一定程度上限制了它的应用。因此,制备谷胱甘肽脂质体,获得谷
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谷胱甘肽(GSH)在医药、化学和生物等领域有着广泛的应用。谷胱甘肽易氧化、不易透过细胞膜、生物利用率低等问题在一定程度上限制了它的应用。因此,制备谷胱甘肽脂质体,获得谷胱甘肽制备的高包封率,并对其稳定性进行研究,可为进一步的大规模生产谷胱甘肽脂质体打下基础。本文首先建立了制备谷胱甘肽脂质体的检测平台,主要包括还原型谷胱甘肽的检测,谷胱甘肽脂质体的分离及裂解,谷胱甘肽脂质体包封率及包封量的计算等。确定了利用OD230法和Ellman’s检测法检测GSH;用凝胶柱分离法(Sephadex G-25)将谷胱甘肽脂质体和游离GSH分离;用10%的Triton-100(曲拉通)裂解谷胱甘肽脂质体等。尝试采用多种方法制备谷胱甘肽脂质体,如薄膜分散法、玻璃微球法、逆向蒸发法、复乳法、pH梯度法等。通过对上述方法的包封率及特点分析,确定采用包封率较高的复乳法制备谷胱甘肽脂质体,并进一步采用正交试验对复乳法制备脂质体方法进行优化。优化后的复乳法制备谷胱甘肽脂质体包封率达53%-65%,包封量达24 mg28 mg。通过数据的分析可知,药物与磷脂的比、旋转蒸发时间及温度、内水相糖的种类是影响其包封率和包封量的主要因素。最后对制备的谷胱甘肽脂质体进行质量评估及稳定性初步探究。复乳法制备的谷胱甘肽脂质体质地均匀,平均粒径约为333.6 nm。将谷胱甘肽脂质体保存在4℃和25℃条件下一周。保存在4℃条件下的脂质体乳液和平均粒径没有明显变化,显微镜下观察脂质体没有明显的聚集,脂质体泄露率约为5%。保存在25℃条件下的脂质体泄漏率约为17%。由此可知,4℃可能是保存谷胱甘肽脂质体的较好条件。
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