马铃薯黑胫病菌Dickeya spp.的检测与病害防治研究

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马铃薯黑胫病可造成马铃薯植株主茎和块茎变黑、中空、腐烂,已成为危害我国及美国马铃薯生产最为严重的病害之一。本研究旨在建立马铃薯黑胫病菌Dickeya spp的宏观微观综合检测体系,为我国马铃薯黑胫病菌Dickeya spp.的检测奠定基础;筛选对马铃薯黑胫病的抗性品种,测定不同种类杀菌剂对马铃薯黑胫病的防治效果,明确各杀菌剂的防效及安全性,为马铃薯黑胫病的防治研究奠定了基础,主要内容和结果如下:  1.建立了传统方法与分子方法相结合的马铃薯黑胫病菌Dickeya spp.的综合检测体系。通过比较筛选出最优的CVP选择性培养基,应用CVP和NGM鉴定性培养基逐步完成对病原菌的鉴定。而后配合分子检测方法,建立了综合检测体系。利用此体系对美国六个州的疑似感染马铃薯黑胫病的植株进行检测,结果显示:单层CVP培养基培养筛选菌株效果最好;宏观、微观检测结果相互印证,可有效区分Dickeya spp.与其他常见马铃薯病菌。此检测体系稳定可行,可应用于对病原菌Dickeya spp.的检疫与监测。  2.在室内离体条件下,筛选了马铃薯黑胫病的抗性品种。改进了马铃薯黑胫病抗性品种筛选和评价方法,通过测量接种点以下区域的深度与宽度,以二者乘积模拟腐烂区域体积,利用此法筛选出对病原菌WPP163(Pectobacterium wasabiae)的抗性马铃薯品种Red Burt、Ranger Russet、Norglean和Sangre,以及对病原菌ME30(Dickeya dianthicola)的高抗品种Ranger Russet和抗性品种Sangre、Pantonac、Satapa和Wasca,可应用于我国马铃薯黑胫病的抗性引种。  3.离体条件下,用滤纸片扩散法筛选评价了18种精油对马铃薯黑胫病菌的抑制作用,所得结果为:精油Oregano(牛至)的抑菌效果最好,对病原菌ME30、3937、WPP163和WPP14的抑菌圈直径分别为:56.28mm、49.13mm、58.50mm和47.63mm;用纸碟法比较17%的农用链霉素、Oregano、Clove、五水合硫酸铜和Regalia制剂的抑菌效果,结果表明:精油Oregano的抑菌效果最好,当抑菌圈直径为10mm时,对病原菌ME30、WPP163、WPP14、3937的有效抑制浓度分别为:469.79mg/L、380.19mg/L、478.63mg/L和323.59mg/L;用肉汤稀释法测定17%的农用链霉素、精油Oregano、精油Clove、五水合硫酸铜的MIC和MBC,结果显示:精油Oregano的MIC和MBC最低,当作用于病原菌ME30时,MIC和MBC分别为156mg/L和625mg/L,当作用于WPP163时,MIC和MBC分别为156mg/L和313mg/L。  4.通过温室活体药效试验,测定了17%的农用链霉素、精油Oregano、五水合硫酸铜及辣根素对马铃薯黑胫病的防效:精油Oregano的防效优于其他类型的杀菌剂;感染了马铃薯黑胫病菌WPP163的马铃薯植株,经精油Oregano处理后,植株的主茎高度和产量分别为74.2cm、748.6g,二者均显著高于其他杀菌剂处理过的植株,表现出良好防效;感染了病原菌ME30的马铃薯植株,经精油Oregano处理后,主茎高度为70.9cm,显著高于经五水合硫酸铜、17%的农用链霉素处理过的植株,产量为493.4g,显著高于其他杀菌剂处理过的植株产量,表现出良好防效;对不同杀菌剂的药害进行了研究,结果显示:仅由杀菌剂处理的马铃薯植株的茎高及产量与清水对照组无显著差异,说明本实验所使用的杀菌剂可应用于马铃薯黑胫病的安全防治。
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