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抑郁症(depression)是一组以显著而持久的心境低落为主要特征的综合征,属于心理精神疾病的范畴。抑郁症发病的特点是慢性、反复发作,临床上以心境低落、快感丧失为特征,并常伴有睡眠异常、食欲减退、体重减轻、性欲减退等躯体症状,是目前世界上最易致残的疾病之一。据世界卫生组织统计,抑郁症已成为世界第四大疾患,预计到2020年,可能成为仅次于冠心病的第二大疾病。抑郁症对患者及其家属造成的痛苦,对社会造成的损失是其他疾病所无法比拟的,研究抑郁症的发病机制和抗抑郁的治疗迫在眉睫。本实验旨在探讨红景天和缬草联合应用对慢性应激导致的抑郁大鼠行为、血清皮质醇、大脑海马5-羟色胺及其细胞增殖、分化和凋亡的影响。本研究分为三个部分:
第一部分:抑郁症大鼠模型的建立及鉴定
目的:探讨采用慢性应激(chronic mild stress,CMS)建立抑郁症大鼠模型并对抑郁症大鼠模型进行鉴定。方法:将70只SD雄性大鼠分为正常对照组和制备抑郁症模型组,正常对照组10只,制备抑郁症模型组60只。制备抑郁症模型组大鼠给予4周慢性应激,正常对照组不给予任何刺激。每周检测大鼠体重、自来水摄取量、1%糖水摄取量。结果:制备抑郁症模型组大鼠的体重增加幅度比正常对照组大鼠的体重增加幅度明显减小;自来水摄取量并未随时间的推移而发生变化;与正常对照组大鼠比较,制备抑郁症模型组大鼠的糖水摄取量呈下降趋势。结论:采用慢性应激能够成功制备抑郁症大鼠模型。
第二部分:红景天和缬草联合应用对慢性应激导致的抑郁大鼠行为、大脑海马5-羟色胺水平及其细胞增殖分化的影响
目的:探讨红景天和缬草联合应用对慢性应激导致的抑郁大鼠行为、大脑海马5-羟色胺(serotonin,5-HT)水平及其细胞增殖分化的影响。方法:SD成年雄鼠70只,将其分成7组:即正常对照组、未用药模型组、阴性对照模型组、阳性对照模型组、红景天模型组、缬草模型组及红景天+缬草模型组。每组各10只动物。除正常对照组大鼠外,其余6组大鼠给予为期4周的慢性应激,使这些大鼠患上抑郁症。除未用药模型组大鼠正常饲养外,其余6组大鼠分别灌服羧甲基纤维素钠(一种药物溶剂)、氟西汀(一种抗抑郁药物)、红景天、缬草及红景天+缬草,灌服药物周期均为3周。在灌药期间,每周对上述7组大鼠进行体重、自来水摄取量、1%糖水摄取量测试。在灌药结束后,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)、5-溴脱氧尿嘧啶(bromodeoxyuridine,BrdU)和β-微管蛋白Ⅲ(β-mbulin Ⅲ,Tuj 1)免疫荧光组织化学双标记染色、中性红染色对大鼠海马组织进行检测。结果:除了未用药模型组及阴性对照模型组外,其它各组的体重均达到正常对照组。7组大鼠的自来水摄取量在整个实验过程中没有明显变化。红景天、缬草、红景天+缬草能够使抑郁大鼠的1%糖水摄取量增加并达到正常水平。红景天和红景天+缬草能使抑郁大鼠海马5-HT水平恢复至正常大鼠水平;灌服缬草后能提高抑郁大鼠海马的5-HT并且超过正常大鼠水平。红景天能使抑郁大鼠大脑海马:BrdU阳性细胞数目到正常水平;缬草、红景天+缬草可使抑郁大鼠大脑海马BrdU阳性细胞数目增加,并超过正常水平。红景天、缬草、红景天+缬草可使抑郁大鼠大脑海马新生神经元增加到正常水平。红景天、缬草、红景天+缬草都能使抑郁大鼠海马神经元细胞增加到正常水平。结论:红景天和缬草联合应用能够促使抑郁大鼠恢复正常的行为活动,提高慢性应激导致的抑郁症大鼠大脑海马5-HT水平以及促进海马神经干细胞的增殖和分化。
第三部分:红景天和缬草联合应用对慢性应激导致的抑郁大鼠血清皮质醇水平、大脑海马神经元凋亡的的影响
目的:探讨红景天和缬草联合应用对慢性应激导致的抑郁大鼠血清皮质醇水平及大脑海马神经元凋亡的影响。方法:应用SD成年雄鼠35只,分组、造模、灌药与第二部分相同。灌药结束后,检测大鼠血清皮质醇水平,海马caspase-3免疫组化了解海马神经元凋亡情况。结果:灌服红景天、缬草、红景天+缬草,能使抑郁大鼠血清皮质醇水平明显降低,并达到正常对照组大鼠的水平。红景天模型组和红景天+缬草模型组的大脑海马caspase-3阳性神经元总数可以恢复到正常水平。缬草模型组大鼠阳性神经元总数低于正常对照组大鼠海马神经元总数。结论:红景天和缬草联合应用能够降低抑郁症大鼠血清皮质醇至正常水平,减少大脑海马神经元凋亡。 结论:
1.采用慢性应激能够成功制备抑郁症大鼠模型。
2.红景天和缬草联合应用能够促使抑郁大鼠恢复正常的行为活动,提高慢性应激导致的抑郁症大鼠大脑海马5-HT水平以及促进海马神经干细胞的增殖和分化。
3.红景天和缬草联合应用能够降低抑郁症大鼠血清皮质醇至正常水平,减少大脑海马神经元凋亡。