在我国,使用中药治疗各种疾病已有千年历史,是中国文化的瑰宝。但随着西药的引入以及科技的不断发展,中药成分的复杂多样性导致其药效成分不明确,阻碍了中药的国际化进程。中药真正走向国际,需要建立在中药的质量控制标准的基础之上。而建立中药的质量控制标准的过程中,离不开中药作用的物质基础研究,这方面的研究可以帮助揭示中药中的药效或毒性的具体成分。中药吴茱萸始载于《神农本草经》,列为中品,属传统的中药温理药,近些年研究发现吴茱萸具有肝毒性作用。本课题组前期实验结果表明,吴茱萸的50%乙醇提取物,连续灌胃给药14天,可使动物血清中的的AST、ALT及肝体系数显著升高（P＜0.01）,证明吴茱萸对肝脏有一定的蓄积毒性作用。但吴茱萸的肝毒性部位在生物体内的代谢情况及肝毒性物质基础并不明确,本课题通过考察不同处理方法和储存时间对生物样品稳定性的影响,采用超高效液相色谱质谱联用（UPLC-QTof-MS）技术,分析和鉴定吴茱萸致肝毒性的活性部位在大鼠给药后的血、尿不同代谢部位中的代谢产物,从而为吴茱萸致肝毒性物质基础的揭示奠定基础。主要的研究内容和成果如下:第一部分采用HPLC-DAD技术,分别对-20℃冰箱中冷冻保存3天、5天、10天、15天未经处理及氮气吹干后的含药血清和含药尿液进行色谱分析。氮气吹干后的含药血清的共有色谱峰RSD值均小于20%,该样品在-20℃至少可以稳定保存15天;未经前处理冻存3天的含药血清的共有峰相对峰面积的RSD值均小于20%,该方法处理的样本3天内稳定性良好。氮气吹干后及未经处理的含药尿液的共有色谱峰RSD值均小于20%,氮气吹干后和未经处理的含药尿液样品在-20℃至少可以稳定保存15天。第二部分应用超高效液相色谱质谱联用（UPLC-QTof-MS）技术,对正常雄性大鼠含药血清进行分析。在吴茱萸致肝毒性活性部位给药后的正常大鼠血清中共标识了 2 1个主要色谱峰,结合质谱和部分标准品信息,鉴定出20个化学成分,其中有15个是药材中原型成分,分别为:去氢吴茱萸碱、吴茱萸宁碱、12a-羟基柠檬苦素、柠檬苦素、二氢吴茱萸次碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、1-甲基-2-壬基-4（1H）喹诺酮、1-甲基-2-[（Z）-5-十一烯]-4（1H）喹诺酮、1-甲基-2-[（4Z,7Z）-4,7-十三烷二烯基]-4（1H）喹诺酮、1-甲基-2-十一烷基-4（1H）喹诺酮、吴茱萸新碱、1-甲基-2-[（6Z,9Z）-6,9-十五烷二烯基]-4（1H）-喹诺酮、二氢吴茱萸新碱、1-甲基-2-[（Z）-9-十五烯]-4（1H）喹诺酮;5个代谢成分分别为:羟基去氢吴茱萸碱、去甲基去氢吴茱萸碱、14-甲酰基二氢吴茱萸次碱、羟基吴茱萸次碱、羟基吴茱萸碱。第三部分应用超高效液相色谱质谱联用（UPLC-QTof-MS）技术,在吴茱萸制肝毒性活性部位灌胃给药后的大鼠尿液中,共标识出20个色谱峰,结合质谱信息以及部分标准品信息,鉴定出20个化学成分,其中包括15个原型成分,分别为:辛弗林、N,N-二甲基-5-甲氧基色胺、去氢吴茱萸碱、12a-羟基柠檬苦素、柠檬苦素、6β-乙酰氧-5表柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、1-甲基-2-壬基-4（1H）喹诺酮、1-甲基-2-[（Z）-5-十一烯]-4（1H）喹诺酮、1-甲基-2-十一烷基-4（1H）喹诺酮、吴茱萸新碱、二氢吴茱萸新碱、1-甲基-2-[（Z）-9-十五烯]-4（1H）喹诺酮、1-甲基-2-十五烷基-4（1H）-喹诺酮;5个代谢成分,分别为:去氢吴茱萸碱葡萄糖苷酸结合物、去氢吴茱萸碱硫化物、羟基去氢吴茱萸碱、去甲基去氢吴茱萸碱、羟基吴茱萸碱。将含药血清和含药尿液中的化学成分进行对比,发现二者共同存在的化学成分有14个成分,其中11个原型成分分别为:去氢吴茱萸碱、12a-羟基柠檬苦素、柠檬苦素、吴茱萸碱、吴茱萸次碱、1-甲基-2-壬基-4（1H）喹诺酮、1-甲基-2-[（Z）-5-十一烯]-4（1H）喹诺酮、1-甲基-2-十一烷基-4（1H）喹诺酮、吴茱萸新碱、二氢吴茱萸新碱、1-甲基-2-[（Z）-9-十五烯]-4（1H）喹诺酮;3个代谢成分分别为:羟基去氢吴茱萸碱、去甲基去氢吴茱萸碱、羟基吴茱萸碱。通过本课题的研究,考察了体内样品的稳定性,确定了吴茱萸致肝毒性的活性部位,运用液质联用技术对大鼠灌胃服药后在血清、尿液的化学成分进行分析和鉴定,对阐明吴茱萸致肝毒性作用药效物质基础研究具有重要意义,为指导吴茱萸作为致肝毒性中药的进一步研究及临床用药提供了可靠依据。