【目的】以宫颈癌细胞株Hela细胞为研究对象,采取短链RNA沉默技术阻断细胞膜上的CaT1通道,观察其对化疗药物顺铂引起的Hela细胞凋亡的影响,探讨抑制CaT1基因的表达对化疗增敏作用的机制。【方法】根据RNAi设计原理以及基因重组技术构建siRNA-CaT1表达载体,转染人类宫颈癌细胞(Hela),MTT检测细胞的存活率,RT-PCR检测AKT-1、Bax、Bcl-2、IκB mRNA的表达。【结果】1)酶切鉴定与DNA测序分析证明CaT1基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CaT1基因的表达水平明显降低。2)MTT结果显示,RNAi沉默CaT1的表达可以明显增加顺铂对Hela细胞的抑制作用。3)RT-PCR结果显示,单独使用顺铂并不改变AKT-1及IκBmRNA的表达,而仅增加Bax/Bcl-2的比值,而转染pSH1Si-CaT1后同时加入顺铂的各组Hela细胞,不仅Bax/Bcl-2比值升高得更加明显,而且AKT-1、IκB mRNA表达明显下调。【结论】1)成功构建的CaT1-RNAi表达载体能特异性沉默Hela细胞中CaT1的表达。2)沉默CaT1基因的表达能抑制Hela细胞的增殖,并能够明显增加顺铂对Hela细胞的抑制作用,即沉默CaT1基因表达可增加Hela细胞对顺铂敏感性。3)沉默CaT1基因引起的顺铂增敏作用可能与抑制AKT及IκB的表达,从而直接或间接调控凋亡相关蛋白Bcl-2家族(Bax/Bcl-2)的表达有关。表明沉默CaT1基因在顺铂促进细胞凋亡的过程中有协同作用。