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常山胡柚(Citrus Paradisi cv.Changshan Huyou)起源于常山县青石乡胡家村,因其具有耐瘠、耐寒、耐贮等优良品质,被誉为“中华第一杂柑”,具有清热解毒、镇咳化痰、稳定血糖、解酒醒脑、排毒养颜、延年益寿等诸多功效。研究表明胡柚中的黄酮类物质是其主要活性成分,但在生长发育中的含量变化和水解工艺方面的研究较少。本课题对常山县15个村的胡柚果实生长过程中黄酮含量进行检测;依据黄酮不同极性进行联合提取,对水提的极性较高的黄酮糖苷,探讨了其酸促水解的最佳工艺条件,并对比了水解前后的抗氧化能力;通过正交实验优化了胡柚中低极性的多甲氧基黄酮的提取工艺并用石油醚进行初步分离。本课题的研究将为开发富含胡柚黄酮的食药保健品提供参考。对常山县15个村的胡柚在6-10月份生长过程中的芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷四种黄酮含量的变化进行了检测。结果表明,常山县15个村的胡柚中四种黄酮6-10月份平均含量的总含量大小按产地排序依次为:红旗村>同弓山>新品种>太公山>小白石村>东案>丁家坞>太公山(赵)>五里>大桥>蒋莲铺村(十八里)>青石>老坞>阁底>龙绕。6-10月份的胡柚中四种黄酮15个村平均含量的总含量大小按时间排序依次为:6月上旬>6月下旬>7月上旬>9月>7月下旬>8月上旬>8月下旬>10月。常山胡柚果实中的黄酮主要为柚皮苷和新橙皮苷,平均含量分别为54.51mg/g和39.61mg/g,而芸香柚皮苷和橙皮苷的含量较少,平均含量只有8.97mg/g和7.90mg/g。利用盐酸对胡柚黄酮中极性较高的黄酮进行水解,通过单因素试验和正交试验得出,各因素对胡柚黄酮水解产物柚皮素水解率的影响大小依次为:盐酸浓度>水解温度>料液比>水解时间;对水解产物橙皮素水解率的影响主次顺序为:水解温度>料液比>盐酸浓度>水解时间。胡柚黄酮酸促水解的最佳工艺条件为:盐酸浓度1.0mol/L、水解温度70℃、水解时间60min、料液比1:30,在此条件下柚皮素的水解率为19.02%,橙皮素的水解率为18.11%。采用DPPH法(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)和ABTS法(2,2-二氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)对胡柚黄酮及其水解产物的抗氧化活性进行对比研究,结果表明,胡柚黄酮及其水解产物对DPPH及ABTS自由基均具有一定的清除作用,对DPPH自由基的半数清除率IC50值分别为10.174mg/mL和4.411mg/mL,对ABTS自由基的半数清除率IC50值分别为7.389mg/mL和2.069mg/mL,胡柚黄酮经盐酸水解后清除DPPH和ABTS自由基的能力均明显高于同浓度的胡柚黄酮。采用超声波辅助法提取了胡柚黄酮中低极性的多甲氧基黄酮,在单因素试验的基础上,进行正交试验,得出试验中各因素对川橙皮素和桔皮素提取率的影响主次顺序为:乙醇浓度>料液比>提取时间>提取温度。超声波辅助提取胡柚多甲氧基黄酮的最佳工艺条件为:乙醇浓度60%、提取温度70℃、提取时间90min、料液比1:40,在此条件下川陈皮素的提取率为0.278mg/g,桔皮素的提取率为0.144mg/g。研究了溶剂萃取法对胡柚多甲氧基黄酮粗提液的初步纯化效果。选用石油醚进行萃取,通过HPLC分析,测得产物中多甲氧基黄酮的总得率为1.12mg/g,川陈皮素的纯度为24.98%,桔皮素的纯度为13.15%。经过初步分离,产物纯度明显高于粗提物纯度。