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目的：证明KCa3.1通道在原发性肝细胞癌中的表达,明确其表达特点及表达定位方法：采用Western Blotting技术及实时定量PCR检测KCa3.1在原发性肝细胞癌组织及癌旁组织的表达情况；检测KCa3.1在多种细胞株中的表达情况；使用免疫荧光技术检测KCa3.1在细胞中的表达定位。结果：证实了原发性肝细胞癌组织中的KCa3.1的表达。KCNN4mRNA在癌组织中的表达较癌旁组织高,差异具有统计学意义(P<0.05)。证实了KCa3.1在多种细胞株中的表达。KCa3.1在肝癌细胞中的表达定位于细胞膜上。结论：原发性肝细胞癌组织中存在KCa3.1的表达,其表达可能与肝细胞癌生理功能有关。为进一步研究奠定了基础目的：研究KCa3.1在肝癌细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期调控及恶性肿瘤特征中的作用；验证调控药物对KCa3.1的电生理作用。方法：使用膜片钳技术验证TRAM-34阻断KCa3.1的电生理作用；采用MTT法研究KCa3.1对肝癌细胞增殖的影响；采用流式细胞术研究KCa3.1对肝癌细胞凋亡与细胞周期的影响；采用集落形成实验研究KCa3.1对肝癌细胞集落形成能力的影响；采用transwell小室研究KCa3.1对肝细胞癌侵袭及迁移能力的影响。结果：证实了TRAM-34可以阻断KCa3.1的开放；TRAM-34可通过阻断KCa3.1抑制肝癌细胞的增殖,促进肝癌细胞的凋亡并阻滞肝癌细胞周期的进程；TRAM-34可通过阻断KCa3.1抑制肝癌细胞的集落形成能力、侵袭能力及迁移能力；EBIO可通过激活KCa3.1抑制肝癌细胞的增殖。结论：KCa3.1参与调控肝癌细胞的增殖、凋亡、细胞周期及恶性特征；明确了KCa3.1在肝癌细胞生理活动中发挥的作用；成功在体外利用通道调节剂干预离子通道,调控肿瘤细胞的恶性进程目的：研究KCa3.1对肝癌细胞信号通路的调控。方法：使用western blotting技术检测TRAM-34阻断KCa3.1对肝癌细胞MAPK信号通路、凋亡相关信号通路、细胞周期调控蛋白及肿瘤细胞趋化因子的影响。结果：使用TRAM-34阻断KCa3.1的开放,可下调HepG2细胞中ERK1/2的磷酸化水平,上调JNK/SAPK的磷酸化水平,与p38通路无明显关系;TRAM-34阻断KCa3.1可上调p27的表达,与p21及cyclin El的表达无直接关系；TRAM-34阻断KCa3.1可上调caspase-3的活化,下调bcl-2的表达；TRAM-34阻断KCa3.1可下调CXCR4的表达。结论：成功探索了KCa3.1与增殖、凋亡、细胞周期及细胞因子分泌相关信号通路之间的关系；为KCa3.1调控肿瘤细胞生理活动的作用提供了理论基础和实践证据。目的：研究KCa3.1在体内成瘤中的作用,探索其治疗效应。方法：使用RNA干扰技术检测下调KCa3.1的表达对肝癌细胞体内成瘤增殖及凋亡的影响；使用免疫组织化学技术检测下调KCa3.1的表达对肝癌细胞体内成瘤肿瘤新生血管生成的影响。结果：使用siRNA体内转染技术下调KCa3.1的表达,可降低成瘤组织的增殖,促进成瘤组织的凋亡；下调KCa3.1的表达可降低增殖相关核因子Ki67的表达；下调KCa3.1可降低VEGF的表达,进而减少肿瘤新生血管样结构的生成。结论：成功在体内成瘤模型中验证了下调KCa3.1对肿瘤形成的抑制作用；为KCa3.1在体内治疗中的研究提供了理论基础和实践证据。