目的:本研究通过调查不锈钢冶炼工人的职业史、检测作业环境铬的外暴露浓度、作业工人血铬内暴露浓度、外周血P16基因甲基化状态及氧化应激指标,探讨职业性铬暴露对作业工人外周血P16基因甲基化状态及P16基因下游蛋白表达水平的影响,分析氧化应激与P16基因甲基化间关系,为铬的毒性机制研究提供依据;探讨职业性铬暴露工人外周血P16基因甲基化的影响因素,为职业防护和健康管理提供理论依据。方法:本研究选择某钢铁集团公司男性不锈钢冶炼工人216人为铬暴露组,其中炉前工67人、连铸工97人以及浇钢工52人,对应工作环境分别为炼钢车间、连铸车间及浇钢车间;选择男性锅炉运行工121人为对照组,对应工作环境为锅炉运行车间。研究对象近期3个月无抗肿瘤药物服用史、电离辐射接触史。参照《工作场所空气中有害物质监测的采样规范》(GBZ159-2004)及《工作场所空气有毒物质测定》(GBZ/T160-2004)对作业工人作业场所监测采样;采用统一设计的调查问卷对研究对象进行流行病学调查;抽取工人班后空腹3ml抗凝静脉血与3ml非抗凝静脉血。采用石墨炉原子吸收光谱法(Graphite furnace atomic absorption spectrophotometry)检测研究对象作业环境中铬及其化合物浓度及血清铬含量;全血提取DNA,采用甲基化特异性PCR法(Methylation-Specific PCR,MSP)扩增P16基因并测定其甲基化状态;采用酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)检测血清8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和P16蛋白的含量。对分类变量进行2c检验,对连续性变量采用t检验及方差分析,分析工种、班次、工龄、吸烟及饮酒等对职业性铬暴露工人的外周血P16基因甲基化的影响,采用非条件logistic回归进一步分析外周血p16基因甲基化的影响因素。结果:1.研究对象铬的内外暴露检测结果暴露组炼钢车间、连铸车间、浇钢车间与对照组锅炉运行车间铬及其化合物暴露浓度作t检验,结果暴露组各个车间铬及其化合物浓度均高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)。暴露组血铬浓度高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.001)。暴露组人群具体按工种分为炼钢工组、连铸工组及浇钢工组,加之对照组锅炉车间组;进行组间的血清铬含量方差分析发现,四组间血铬含量差异具有统计学意义(p<0.001)。进一步采用lsd-t检验对四组人群做两两比较,差异均具有统计学意义(p<0.001)。2.研究对象外周血p16基因甲基化率及p16蛋白表达含量的比较经2c检验暴露组外周血p16基因甲基化率明显高于对照组,差异有统计学意义(p<0.001);经wilcoxon秩和检验暴露组血清p16蛋白表达含量低于对照组,差异具有统计学意义(p<0.024);t检验分析氧化应激指标显示:暴露组血清8-ohdg含量高于对照组,差异具有统计学意义(p=0.012);暴露组血清gsh含量低于对照组,差异有统计学意义(p=0.028);暴露组与对照组间血清mda含量差异无统计学意义(p>0.05)。spearman秩相关分析结果外周血p16基因甲基化与血清8-ohdg、mda和gsh含量间并无显著相关性(p=0.492、0.710和0.085)。3.职业性铬暴露人群外周血p16基因甲基化影响因素分析因素lsd-t检验炼钢工连铸工和浇钢工间外周血p16基因甲基化率,差异有统计学意义(p<0.001);倒班组的外周血p16基因甲基化率明显高于长白班组,差异具有统计学意义(p<0.001)。暴露人群按工龄分组,30~38年工龄段工人外周血p16基因甲基化率最高(80.5%),随工龄的增加外周血p16基因甲基化率呈升高趋势,各工龄段差异具有统计学意义(趋势2c=9.018,p=0.029);暴露人群吸烟组与非吸烟组外周血p16基因甲基化率差异无统计学意义(p>0.05);暴露人群饮酒组与非饮酒组外周血p16基因甲基化率差异亦无统计学意义(p>0.05);非条件logistic回归分析显示:高血铬浓度(OR=1.956,95%CI:1.285~2.977)与倒班(OR=2.408,1.795~5.828)为职业性铬暴露工人外周血P16基因甲基化的危险因素。结论:1.不锈钢冶炼车间空气铬及其化合物浓度明显高于锅炉运行车间,但未超过国家职业卫生标准(0.05 mg/m3)。不锈钢冶炼工人外周血铬(4.15ug/L)含量显著高于对照组(1.56ug/L)。2.职业性铬暴露组外周血P16基因甲基化率高于对照组,P16蛋白表达含量低于对照组。3.血清高铬含量与倒班为职业性铬暴露工人外周血P16基因甲基化的危险因素。