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研究背景及目的:甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是临床中最常见的内分泌恶性肿瘤,近年来其发病率逐年上升,约有10%-15%的PTC患者常出现远处转移和复发,导致其对标准治疗的效果较差,预后不佳。因此,研究PTC形成和发展的分子机制是十分必要的,对寻找PTC治疗新药,提高PTC患者的预后具有重要意义。微小RNA(microRNA,miRNA,miR)是一类长约22个核苷酸的非编码RNA,参与调节细胞分化、增殖和代谢等基本的生理过程。异常表达的miRNA能够从转录后水平调控各种致癌或抑癌基因的表达,从而调控多种恶性肿瘤的发生和发展,而miR-206在多种癌症中如乳腺癌、肝癌、胃癌等有异常表达,其在甲状腺乳头状癌组织中的表达量较正常组织中低,但miR-206对甲状腺乳头状癌具体生物功能及机制尚未阐明。肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的受体c-Met与HGF结合后,可导致酪氨酸残基磷酸化并激活PI3K/Akt/mTOR通路,异常激活的c-Met/Akt/mTOR信号通路与甲状腺癌、宫颈癌等多种恶性细胞的增殖和迁移密切相关,然而,在PTC中,miR-206能否通过抑制c-Met/Akt/mTOR信号通路而发挥抑癌作用,尚未见相关报道。本研究目的是探索miR-206对甲状腺乳头状癌K1细胞增殖和迁移的影响,验证c-Met为miR-206的靶基因,并研究与其调控相关的可能的信号通路,为甲状腺乳头状癌临床靶向治疗筛选新的分子干预靶点。方法:取对数生长期甲状腺乳头状癌K1细胞,分为3组,即空白组(Blank组):未行任何转染;阴性对照组(miR-NC组):转染miR-206阴性对照物;实验组(miR-206mimic组):转染hsa-miR-206 mimic(miR-206模拟物)。采用逆转录定量PCR(RT-qPCR)技术检测转染后各组细胞miR-206的表达水平;CCK-8实验和台盼蓝染色活细胞计数检测K1细胞的增殖能力;Transwell迁移小室实验检测K1细胞的迁移能力;利用生物信息学软件预测miR-206的靶基因;采用双荧光素酶报告基因检测法验证miR-206和c-Met的靶向关系;Western blot检测c-Met/AKT/mTOR通路中各蛋白水平的变化。结果:K1细胞瞬时转染miR-206 mimic后,RT-qPCR检测实验组K1细胞中miR-206的相对表达量较空白组和阴性对照组明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05);CCK-8及台盼蓝染色活细胞计数实验表明,与空白组、阴性对照组相比,转染miR-206 mimic的实验组中K1细胞的增殖能力明显受到抑制(P均<0.05);Transwell实验发现实验组K1细胞的迁移数低于空白组和阴性对照组(P均<0.05);双荧光素酶报告基因检测表明miR-206可负调控靶基因c-Met的表达;Western blot结果显示实验组细胞中p-Met、p-AKT和p-mTOR蛋白的表达水平明显降低(P<0.05)。结论:上调miR-206的表达可抑制甲状腺乳头状癌K1细胞的增殖和迁移能力,其作用机制可能与miR-206靶向调控c-Met抑制AKT/mTOR信号通路激活有关。