论文部分内容阅读
目的神经胶质瘤是一种常见的恶性肿瘤,常规治疗的疗效及预后均较差。研究认为肿瘤细胞的凋亡抑制或失衡与胶质瘤的发生、发展关系密切。而Caspase-3可以诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的生长,增强其对化疗和放疗的敏感性。本实验观察重构型Caspase-3诱导SHG44人脑胶质瘤细胞的凋亡,抑制肿瘤细胞生长、治疗肿瘤的效果。方法18只裸鼠随机分成3组:实验组(A),空载体组(B),对照组(C)。根据分组,分别将用脂质体包裹的重构型Caspase-3基因真核表达载体(pcDNA-Rev-caspase-3)、空载体和生理盐水注入裸鼠皮下SHG 44人脑胶质瘤内。用RT-PCR法检测重构型Caspase-3在肿瘤细胞中的表达情况;观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率,结合病理组织学、电镜观察确定重构型Caspase-3裸DNA对人脑胶质瘤的作用。结果皮下接种肿瘤细胞后,各组致瘤率平均为100%。A、B和C组肿瘤生长速率无显著性差异(P>0.05);在21d后,B和C组肿瘤呈现快速的近指数生长,A组肿瘤仍缓慢生长,A与B或C组肿瘤生长速率相比有显著差异(P<0.05),B和C组肿瘤生长速率相比无显著差异(P>0.05);在40d实验结束时, A组抑瘤率为46.1%。A与B或C组肿瘤相对体积比较有显著差异(P<0.05),B和C组肿瘤相对体积比较无显著差异(P>0.05)。1. HE染色实验组肿瘤HE染色见肿瘤细胞分布不均,排列松散,瘤体有较多的肿瘤细胞死亡。对照组肿瘤细胞分布均匀,排列紧密,部分区域肿瘤细胞呈巢状排列。2.RT-PCR检测实验组瘤组织经RT-PCR获得一个基因片断,经电泳证实为894bp大小的重构型Caspase-3基因片断。空载体组和对照组未获得相关大小的基因片断。3.电镜实验组瘤细胞呈现染色质边集,聚集核膜下,继而出现核固缩,有凋亡小体形成。对照组瘤细胞未发生凋亡。结论1.重构型Caspase-3能够在SHG 44人脑胶质瘤中表达。2.重构型Caspase-3裸DNA能够促进肿瘤凋亡,导致肿瘤细胞死亡,抑制人脑胶质瘤生长。3.为进一步研究胶质瘤的基因治疗打下了坚实基础。