水稻多逆境诱导基因OsUF6的功能分析

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世界上超过三分之一的人口以水稻为主要粮食和糖类资源,水稻作为一种重要的谷类作物,在世界范围内广泛种植。目前已经有很多逆境响应的基因在水稻中被证实,然而水稻中含有大量的未知功能功能基因未被研究,在这之中我们推测有很多逆境响应有关的基因。因此,我们利用水稻基因芯片Affmeterix分析了水稻籼稻栽培种培矮64S在各种非生物逆境胁迫下的表达谱,表达谱涵盖了不同时期中水稻的各个器官的表达数据,我们从中筛选了一个候选基因作为研究,由于该基因位于水稻第6号染色体上,我们命名为OsUF6(Oryza sativa unknown function)。主要研究结果如下:(1)生物信息学分析显示,该基因OsUF6定位于水稻第6号染色体上,c DNA大小为517bp,不含有内含子,开放阅读框(open reading frame)为273bp,蛋白分子量为10.01k D,等电点约9.58,编码91氨基酸残基组成的蛋白。(2)使用Rice GE(Gene Expression Atlas)在线数据库分析,OsUF6在干旱、高盐、低温等胁迫下其表达量明显提高,但在干旱条件下的表达量最高,说明OsUF6基因主要受干旱诱导表达,同时也受低温以及高盐的诱导表达。(3)OsUF6基因通过荧光定量PCR初步显示该基因响应高盐胁迫,低温胁迫,在干旱胁迫和脱落酸处理下表现为敏感。(4)收获了75株OsUF6超表达转基因水稻植株T1代种子,52株反义表达转基因植株水稻T1代种子,3株OsUF6启动子转基因水稻植株T1代种子。(5)在对获得的转基因水稻种子经过筛选阳性植株后的逆境处理,结果显示OsUF6的超表达提高了转基因水稻的耐盐,耐低温能力,OsUF6启动子转基因植株GUS活性显示在水稻的各个部位都有所表达,在逆境胁迫处理中,OsUF6启动子GUS活性在高盐盐、低温中表达量明显上调。(6)OsUF6蛋白定位于叶绿体中。OsUF6基因增加了水稻在逆境胁迫中的抗盐,抗低温能力,提高了转基因水稻在高盐,低温中的存活率,间接的增加了水稻的产量。
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