药物性能是对药物的各种性质及功能的一种概括,而药物的四性、五味正是药物性能的具体体现,中药对性味的描述始载于神农本草经,而后的历版本草书藉中均对药物性能加以表述,药物的四性五味是中医理论的重要组成部分。本课题研究是在系统理清中药性味理论的基础上,依据“中药一味一性,一药X味Y性(Y≤X) ”的中药性味理论新假说,采用现代科学技术手段和现代研究方法,对中药知母进行化学成分的拆分,并对拆分组分的功效进行研究,探索中药性味与组分的相关性,证实中药性味理论假说的客观存在。知母为百合科植物知母Anemarrhena asphocdeloides Bge.的干燥根茎。苦、甘,寒。归肺、胃、肾经。具有清热泻火,滋阴润燥的功效,临床上用于治疗外感热病,高热烦渴,肺热燥咳,骨蒸潮热,内热消渴,肠燥便秘。本文不仅针对知母展开了化学成分与药理作用的相互验证,同时为知母的性味物质基础进行了归类;不仅从知母中分离得到了两个具有特异性功效的新化合物,又对鲜有报道的知母多糖进行了分离测定;不仅对“中药一味一性,一药X味Y性(Y≤X)”的中药性味理论进行了验证,又丰富了中医学的知识和内容,对于开创一个中药拆分组分,甚至一药多用开辟了研究思路并开创了道路。本文对中药性味理论的发展进行了系统阐述,通过对我国历代本草关于性味的记载,丰富了中医药理论的内容,通过对传统的中医药理论进行梳理,为本课题的开展奠定了扎实的理论基础,为进一步的药理作用研究提供了理论依据。通过对知母药材的化学成分、药理作用及临床使用情况的综合整理,为本课题开展化学组分的拆分提供了充分的理论保障。从而更清晰的对拆分组分与性味进行归属研究。本文针对知母药材展开了其性味的考证,从始载《神农本草经》到《中国药典》2010年版一部,知母的性味从“味苦、寒”到“苦、甘、寒”,其间各个时期对知母性味的记载亦经历了较大的变化,主要表现在知母的药味由“单味-苦”到“复合药味-苦、甘”的转变,文章详细论述了知知母药味的演变过程。遵循中医药基本理论,根据有关知母的化学成分及其药理作用的文献报道,本着中医传统临床用药的实际情况,以符合知母具体味所代表的功效为指导,以知母水煎液为基础,采用乙醇沉淀,大孔吸附树脂富集、纯化,乙酸乙酯及正丁醇萃取的方式,将知母药材拆分为多糖组分、乙酸乙酯层组分、正丁醇层组分和水层组分。并采用一般化学特征研究、薄层色谱研究、高效液相色谱研究等手段,对拆分四部分组分进行化学成分归属及成分的互不交叉验证。多糖组分中主要组成为知母多糖,乙酸乙酯层组分中主要为双苯吡酮类成分,正丁醇层组分中主要为甾体皂苷类成分,以上成分均为知母药理作用的物质基础。为了保证知母各拆分组分的重现性,同时也为了更好的诠释药理研究的物质基础,为进一步的活性及药效成分的研究打好基础,分别收集不同产地不同来源的样品,经对其药材来源进行鉴定,并对其质量进行控制达到标准的药材为主要研究对象,同时针对各拆分组分进行统一的质量控制,以保证不同人员不同实验室之间数据的重现性。根据知母各部分成分的拆分特点,采用UV及HPLC色谱法,分别对知母多糖组分、知母乙酸乙酯层组分、知母正丁醇层组分进行了质量控制。建立了乙酯乙酯层组分中以芒果苷为代表的类黄酮类成分的指纹图谱,共确定了 8个共有峰,建立了正丁醇层组分中以知母皂苷BⅡ、知母皂苷BⅢ为代表的皂苷类成分的特征图谱,确定了 7个共有峰。对于保证知母拆分组分的重现性以及对药理作用表征的可重复性,提供了有力的技术保障。对正丁醇层组分以硅胶柱色谱法进行反复分离、经ODS反相柱色谱、凝胶柱色谱、制备型HPLC等现代分离技术和方法,共分离得到21个单体化合物。经理化分析及各种波谱数据的综合解析,鉴定了 11个单体化合物的化学结构,并进行了数据归属。共得到2个新化合物,命名为正丁醇基-2-O- (L-焦谷氨酸-N-6-)-α-D-呋喃果糖苷和正丁醇基-2-O- (L-焦谷氨酸-N-6-) -β-D-呋喃果糖苷。对知母多糖组分进行水溶透析,冻干,离心,通过弱阴弱阳离子交换串联树脂、离子交换纤维素、离子交换琼脂糖凝胶各种高分辨丙烯葡聚糖凝胶等离子交换法进行分离和纯化。首次从知母药材中分离得到4个均一多糖,采用光谱及色谱分析等手段,对所分离得到的知母多糖均一组分进行定性研究,确定了多糖组成的单糖种类。针对知母的药理作用,本文对知母各拆分组分进行了性味药理学研究。实验结果表明:多糖组分、皂苷组分对干酵母及2, 4二硝基酚致热均具有解热作用;多糖组分对二甲苯所致耳肿胀具有抗炎作用;多糖组分具有免疫抑制作用与乙酸乙酯层组分则具有免疫增强作用;正丁醇层组分对水负荷大鼠具有利尿作用;除水层组分外其余各拆分组分对四氧嘧啶高血糖小鼠均具有显著的降糖作用;乙酸乙酯层组分具有止咳作用。对知母的各拆分组分的药理学研究与知母的性味进行归属,知母的“清热泻火”功效是其“味苦,性寒”的作用。可体现在知母的解热作用、抗炎作用及利水作用三个方面,发挥此作用的物质基础为多糖组分和正丁醇层组分。知母的“滋阴润燥”功效是其“味甘,性寒”的作用。可体现在知母的降糖作用及止咳作用。发挥此作用的物质基础为乙酸乙酯层组分。此外,知母还的降糖作用和免疫调节作用,是其“苦”和“甘”味共同作用。