阳明病(阳明腑实证)模型大鼠“欲解时”相关炎症因子变化的研究

来源 :青海大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jerryzhang1805
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目的:探索符合阳明腑实证病程观察的模型建立及观察阳明病(阳明腑实证)模型大鼠“欲解时”相关炎症因子变化。方法:(1)实验大鼠随机分为对照组、高剂量模型组、中剂量模型组、低剂量模型组,注射不同剂量LPS,观察大鼠体温、死亡率、全血细胞计数仪测定白细胞数,酶联免疫法检测血浆LPS、小肠组织IL-6含量。(2)实验大鼠随机分为欲解时对照组、欲解时模型组、非欲解时对照组、非欲解时模型组,建立阳明腑实证大鼠模型后,分别于阳明病“欲解时”及“非欲解时”每天取血及肠组织,连续5天,血细胞分析仪检测血常规,免疫组化法测TLR4蛋白含量,荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)检测肠组织TLR4 m RNA水平。结果:(1)各模型组体温、血浆LPS、肠粘膜IL-6含量均高于对照组,造模成功第5日模型中剂量组白细胞、中性粒细胞显著升高,各剂量模型组死亡率与LPS注射量成正比。(2)欲解时模型组大鼠白细胞、中性粒细胞、单核细胞数较非欲解时模型组升高,其中单核细胞数上升有显著性差异(P<0.05);模型组淋巴细胞明显低于对照组(P<0.05)。欲解时模型组TLR4 m RNA表达及蛋白含量较非欲解时模型组明显降低,第1日TLR4 m RNA相对表达量有显著性差异(P<0.05)。结论:5mg/kg的LPS注射剂量为有效观察阳明腑实证病程变化模型的注射剂量。阳明腑实证病程中,欲解时模型组大鼠中性粒及淋巴细胞较对照组体现出较早较长时间的差异性,意味着欲解时的免疫反应更为明显。TLR4作为炎症通路上游重要的受体,受到LPS刺激后TLR4 m RNA及蛋白表达明显上调,但非欲解时模型组实验大鼠TLR4 m RNA及蛋白水平低于欲解时模型组,表明欲解时阳明腑实证的炎症反应较非欲解时轻,可能与其表达下调相关炎性介质的释放减少有关。
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