本研究针对禽白血病，采集种鸡场血样进行血清学检测，并采集病鸡的组织样品进行病理组织学观察。针对禽白血病病毒(ALV)的保守基因，设计引物建立常规PCR体系，将PCR产物克隆测序，并以重组质粒作为定量检测的模板，选取ALV病毒的LTR序列，利用Primer Express2.0软件设计引物和探针，建立检测ALV的实时荧光定量RT-PCR方法。　　 血清学试验证明所检测的种鸡场有疑似禽白血病临床症状的禽白血病的阳性率为53.3％。通过病理组织学观察，病鸡的肝脏、脾脏，法氏囊和腺胃中有大量的髓细胞样肿瘤细胞。建立的荧光定量PCR方法最低可检出30个拷贝的重组质粒。该方法具有特异性，对新城疫病毒，禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、鸡传染性贫血病毒、传染性喉支气管炎病毒和马立克氏病毒核酸都没有扩增反应。利用建立的实时定量PCR方法对临床90个待检样品进行检测，检出56个阳性，阳性率为62.2％。实时定量RT-PCR检测ALV的方法，灵敏度高，特异性好，可以进行定量分析，在禽病的快速检测上具有重要意义。