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目的：通过检测肿瘤转移相关基因1(MTA1)在肝癌组织及不同侵袭转移潜能人肝癌细胞株中表达的差异,探讨MTA1表达与肝细胞癌侵袭、转移及生物学行为的关系。方法：1.MTA1在肝癌组织中的表达及与nm23、c-myc相关性的研究：实验所选取的石蜡包埋肝细胞肝癌组织标本及新鲜肝细胞肝癌组织标本均来自山东大学附属省立医院。病例收集的原则：①所选病例的临床资料齐全；②所选病例术前未经任何抗肿瘤治疗；③所选病例均经病理证实为肝细胞肝癌。30例石蜡包埋肝癌组织标本选自该院2007年1月至2008年12月经手术切除的存档蜡块,每例蜡块均含有癌组织及相应癌旁组织,将所选石蜡包埋肝癌组织标本制成4～5μm厚的连续切片,用于免疫组化检测。30例新鲜肝癌组织标本选自该院2009年1-5月经手术切除的病例,分别在新鲜肝癌癌灶中心无出血坏死部位及距癌灶边缘3-5cm相应癌旁组织处取材,部分置于-80℃冰箱冻存备用,用于RNA提取；另一部分用10%福尔马林固定24小时,常规石蜡包埋,制成4-5μm厚的连续切片,用于免疫组化检测。分别采用免疫组织化学法、半定量RT-PCR检测肝癌组织及其相应癌旁组织中MTAl蛋白、mRNA的表达,分析其表达与临床病理特征之间的关系,并分析MTA1蛋白表达与肿瘤转移抑制基因nm23-H1表达蛋白及癌基因c-myc表达蛋白的相关性。2.MTA1与肝癌细胞系侵袭转移潜能关系的研究：实验所用的不同侵袭转移潜能人肝癌细胞株为人正常肝细胞株L02,人肝癌细胞株MHCC97-H、SMMC7721、HepG2。分别采用实时定量RT-PCR、Western blot检测人正常肝细胞株L02,人肝癌细胞株MHCC97-H、SMMC7721、HepG2中MTAlmRNA及蛋白的表达；采用Transwell小室体外细胞侵袭实验检测各细胞株的侵袭转移潜能。结果：1.免疫组织化学结果显示,MTA1蛋白主要在细胞核中表达,呈棕黄色颗粒状,MTA1蛋白在肝癌癌组织中阳性表达率为65.0%(39/60),明显高于其在癌旁组织中的表达(30.0%,18/60),二者的差异有显著统计学意义(x2=14.737,P=0.000)。MTA1蛋白在肝癌组织中的表达与肿瘤分化程度、有无肝内、外转移或门静脉癌栓相关(P<0.05)。2.半定量RT-PCR结果显示,MTA1 mRNA在肝癌组织中的平均相对表达量为(0.406±0.037),显著高于其在相应癌旁组织中平均相对表达量(0.189±0.021),两组之间差异有统计学意义(t=4.077,P=0.005<0.05)。MTAlmRNA在肝癌组织中的表达与肿瘤分化程度、有无肝内、外转移或门静脉癌栓相关(P<0.05),与免疫组化的结论一致。3.Spearman相关分析显示MTA1蛋白与nm23蛋白的表达呈负相关(rs=-0.625,P<0.01),与c-myc蛋白的表达呈正相关(r2=0.392,P<0.05)。4.实时定量RT-PCR结果显示,以人正常肝细胞株L02为对照,MTA1 mRNA在细胞株SMMC7721、MHCC97-H HepG2的相对表达量分别为0.336,0.665,0.250。单因素方差分析表明各细胞株中MTA1mRNA表达,以MHCC97-H最高,SMMC7721次之,其次为HepG2,L02最低,且两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。5.Western blot凝胶图像分析结果显示,MTAl蛋白在细胞株L02、SMMC7721、MHCC97-H、HepG2的相对表达量分别为0.050,0.392,0.615,0.237,单因素方差分析表明各细胞株中MTAl蛋白表达,以MHCC97-H最高,SMMC7721次之,其次为HepG2, L02最低,且两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。6.Transwell小室体外细胞侵袭实验结果显示,细胞株MHCC97-H.SMMC7721、HepG2.L02的平均穿膜细胞数分别为(14.17±1.18)个/高倍镜视野,(8.83±0.53)个/高倍镜视野,(3.26±1.04)个/高倍镜视野,(0.00)个/高倍镜视野,两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论：1.肝细胞肝癌组织中MTAl mRNA和蛋白的表达均显著高于其在相应癌旁组织中的表达,且MTAl mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达与肿瘤分化程度、肝内、外转移及门静脉癌栓相关,MTA1蛋白与肿瘤转移抑制基因nm23的表达呈负相关,与癌基因c-myc蛋白的表达呈正相关,提示MTA1可能在肝细胞肝癌的侵袭、转移过程中发挥重要作用,三者的联合检测可更准确的判断肝癌的生物学行为,有助于肝癌的基础研究和临床治疗。2.不同侵袭转移潜能细胞株中MTAl mRNA和蛋白的表达均以MHCC97-H最高,SMMC7721次之,再次为HepG2, L02最低;Transwell小室体外细胞侵袭实验提示所用细胞株的侵袭转移潜能以MHCC97-H最高,SMMC7721次之,再次为HepG2,L02最低,进一步说明MTA1与肝细胞肝癌的侵袭转移密切相关,为研究MTAl与肝细胞肝癌侵袭转移的具体作用机制以及作为肝细胞肝癌基因治疗新靶点的可能性提供了一定的理论基础。