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本论文共分为五章,系统的研究了影响凡纳滨对虾仔虾(Litopenaeus vannamei)生长发育的主要营养素的营养作用,主要研究内容包括:磷源和磷需求、卵磷脂和胆固醇、维生素C和虾青素、鱼蛋白水解物及壳聚醣;主要结果如下:
(1)第一章包括两个实验;首先是研究适合仔虾生长发育需求的最佳磷源;其次是在此基础上研究仔虾的最佳磷需求量。第一个实验是设计四种含有不同无机磷源的等氮等能饲料(D1:没有额外添加磷;D2,D3和D4分别添加NaH2PO4-2H2O,KH2PO4-2H2O和Ca(H2PO4)2-2H2O作为磷源);四种饲料均以鱼粉和鱼蛋白水解物作为主要蛋白源。三种磷源在相应饲料组中的添加量分别为NaH2PO4-2H2O11.6g、KH2PO4-2H2O12.8g、Ca(H2PO4)2-2H2O10g,目的是为了使这三种饲料含有相同量的总磷。每种饲料设三个重复来饲喂初始体重为2 mg的仔虾。依据实验结果,D3饲料组的生长效果最好,D1饲料组的生长效果最差,且两组间有显著性差异(P<0.05);D2和D4饲料组的生长效果处于中间位置,且和D3及D1均没有显著性差异(P>0.05)。成活率在D3饲料组中最高,且显著高于其他各组。从实验的整体结果可以看出KH2PO4-2H2O是凡纳滨对虾仔虾的最适磷源。第二个实验是在第一个实验的基础上,设计四种不同含量KH2PO4-2H2O的等氮等能饲料(d1:0% KH2PO4-2H2O;d2:0.5%KH2PO4-2H2O;d3:1% KH2PO4-2H2O;d4:2% KH2PO4-2H2O);每种饲料设三个重复来饲喂初始体重为0.88 mg的仔虾。虾的生长和成活率在d2饲料组中最好,与其他各组有显著性差异(P<0.05)。虾体中的灰分、钙和磷的含量在d1饲料组中最低,但是当KH2PO4-2H2O添加量超过0.5%时,钙、磷沉积及灰份含量有下降的趋势。虾体中的锌含量在d2饲料组中最高,此后随着KH2PO4-2H2O添加量的增大而减小。总之,结果表明KH2PO4-2H2O是凡纳滨对虾仔虾的最适磷源;饲料中的总磷含量应控制在2.09-2.20%的范围内;KH2PO4-2H20在饲料中的添加量应小于1.0%。
(2)第二章同时开展两个实验来评价胆固醇和磷脂对仔虾的发育影响。在胆固醇实验中,设计四种不同胆固醇水平(0、0.5、1和2%)的等氮等能饲料;每种饲料设三个重复来饲喂初始体重为0.8 mg的仔虾。结果表明不额外添加胆固醇的饲料组有最好的生长效果。成活率在各组之间没有显著性差异(P>0.05)。饲料分析表明,未添加胆固醇的饲料中已经含有0.9%的胆固醇,可见饲料中0.9%的胆固醇已经满足了仔虾对胆固醇的需求;饲料中过量的胆固醇含量对仔虾的生长有负面影响;虾体中的中性脂肪(NL)的含量随着饲料中胆固醇含量的升高而升高;在磷脂实验中,设计五种不同磷脂水平(0、1、2、4和8%)的等氮等能饲料;结果表明,生长效果在磷脂添加量为2、4和8%的饲料组要明显好于磷脂添加量为0和1%的饲料组(P<0.05),并且在磷脂添加量为2、4和8%的饲料组间没有显著性差异(P>0.05)。添加磷脂饲料组的虾的成活率要明显高于未添加磷脂饲料组的虾的成活率(P<0.05),但在添加磷脂的各饲料组间没有显著性差异(P>0.05)。虾体中的脂类分析显示,虾体总脂中极性脂肪的含量随着饲料中磷脂含量的升高而升高,并且极性脂肪含量的升高是由于其中的磷脂酰胆碱(PC)的含量升高引起的。总之,结果表明基础饲料中含有0.9%的固醇已经满足了仔虾对胆固醇的需要,额外添加胆固醇不会有任何积极作用;用增重率通过折线模型得到,在目前的养殖情况下,仔虾饲料中磷脂的最适含量为4.3%。
(3)第三章是评价虾青素对仔虾的发育影响。在本实验中,设计四种不同虾青素(纯度为10%)水平(0、0.1、0.2和0.4%)的等氮等能饲料;每种饲料设三个重复来饲喂初始体重为1.2mg的仔虾;实验结束后,虾的生长结果在未添加虾青素饲料组最差,并且和添加虾青素的饲料各组间均有显著性差异(P<0.05);然而生长结果在添加虾青素的各饲料组间没有显著性差异(P>0.05)。虾青素水平为0-0.2%的范围内,虾的成活率随着虾青素水平的升高而升高,且各组间有显著性差异(P<0.05),但是当虾青素水平达到0.4%时,虾的成活率不再升高,和0.2%虾青素处理组间没有显著性差异(P>0.05)。在虾的体色方面,肉眼能分辩出每组虾体色的不同,在未添加虾青素饲料组,体色是淡蓝色;在添加有虾青素的饲料组中,体色是深蓝色或深褐色,在添加量为0.4%的饲料组的虾的体色是最深的。在生长实验结束后的连续9天的低溶氧胁迫实验期间,虾的成活率在添加虾青素的饲料组中要显著高于未添加虾青素饲料组(P<0.05),当低溶氧胁迫实验结束后,0.2%和0.4%的虾青素处理组的成活率要显著高于其他两组(P<0.05)。总之,饲料中添加0.1%的虾青素已能满足仔虾的生长需求;此外,对于凡纳滨对虾仔虾的成活率、特别是恶劣情况下来说,饲料中的虾青素添加量不能低于0.2%;
(4)第四章来评价维生素C对仔虾的营养价值。在本实验中,添加的维生素C源为Vc—2-多聚磷酸酯(L—ascorbyl—2-polyphosphate: ApP,纯度为35%),设计五种不同的添加水平,添加量分别为0、30、60、90和120 mg100g-1饲料;分析表明五种饲料中对应的维生素C含量分别为9.18,18.84,27.09,36.02及43.58mg100g-1饲料;饲养10天后,仔虾在维生素C含量为9.18 mg100g-1的饲料组中有较高的死亡率,实验结束后,仔虾的成活率和生长结果显著低于其他各组(P<0.05),而生长结果在维生素C含量为18.84,27.09,36.02及43.58 mg100g-1饲料各组中没有显著性差异(P>0.05)。用增重率通过折线模型显示饲料中最适的维生素C含量应为19.09 mg100g-1饲料,但是如果考虑到恶劣环境下的压力刺激,饲料中维生素C的含量不能低于36.02 mg100g-1饲料。
(5)第五章研究饲料中不同含量的鱼蛋白水解物对仔虾生长发育的影响。设计五种不同鱼蛋白水解物水平(H0:0%;H9:9%;H18:18%;H27:27%;H36:36%)的等氮等能饲料,在H0饲料组中,蛋白源为鱼粉;在H9、H18、H27和H36饲料组中,分别有12.5、25、37.5和50%的鱼粉被鱼蛋白水解物替代。每组饲料设三个重复来饲喂初始体重为2mg的仔虾30天。实验结束后,仔虾的成活率在H18和H27处理组中最高;仔虾的增重率在H18和H27处理组中最大,且与H0和H9处理组有显著性差异(P<0.05)。总之,生长结果在H18,H27和H36各处理组间没有显著性差异(P>0.05)。用增重率通过二次回归模型显示最适的鱼蛋白水解物添加水平应为26.36 g100g-1饲料。从整体结果可以看出,适当的添加鱼蛋白水解物对凡纳滨对虾仔虾的生长发育是有益的。
(6)第六章研究饲料中不同含量的壳聚醣对仔虾生长发育的影响。试验设计五种不同壳聚醣水平的等氮等能饲料(C0:0%;C0.05:0.05%;C0.1:0.1%;C0.2:0.2%和C0.4:0.4%),每种饲料设三个水平来饲喂初始体重为1.2 mg的仔虾;实验结果表明,虾的成活率在C0.1饲料组中最高,在C0饲料组中最低,且两组之间存在显著性差异(P<0.05);其他三组饲料组的成活率处于中间位置,且和其他两组均没有显著性差异(P>0.05)。虾的生长结果在C0.2饲料组中是最好的,并且和C0、C0.05和C0.1饲料组间均存在显著性差异(P<0.05);然而当壳聚醣添加量大于0.2%时,生长结果有下降的趋势,尽管没有统计性差异。在生长实验结束后的连续9天的低溶氧胁迫实验中,虾的成活率在C0.1、C0.2和C0.4饲料组中显著高于其他两个组(P<0.05);总之,综合考虑生长和成活率,建议壳聚醣的添加量应维持在0.1-0.2%的水平。